[发明专利]一种基于干细胞的毛发再生技术的方法及应用在审
申请号: | 202110500332.6 | 申请日: | 2021-05-08 |
公开(公告)号: | CN113197918A | 公开(公告)日: | 2021-08-03 |
发明(设计)人: | 吴冬梅;吴炯;林峰;李莉;周宁;赵东海 | 申请(专利权)人: | 奥镁(上海)医药科技有限公司 |
主分类号: | A61K35/28 | 分类号: | A61K35/28;A61K9/19;A61P17/14;C12N5/0775 |
代理公司: | 上海老虎专利代理事务所(普通合伙) 31434 | 代理人: | 葛瑛 |
地址: | 200082 上海市杨*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 干细胞 毛发 再生 技术 方法 应用 | ||
1.一种基于干细胞的毛发再生技术的方法,其特征在于:该基于干细胞的毛发再生技术的方法的具体步骤如下:
S1:获取干细胞:从需要治疗的对象身体上获取间充质干细胞组织,将获取的间充质干细胞组织置于生理盐水中洗净;
S2:培养干细胞:将步骤S1中洗净的间充质干细胞组织获取,置于培养基中培养,直至间充质干细胞组织培养至P3-P5代;
S3:转移培养干细胞:将步骤S2中培养至P3-P5代的间充质干细胞组织获取,并将间充质干细胞组织剪碎,将剪碎后的间充质干细胞组织置于新的培养基中,对剪碎后的间充质干细胞组织继续培养;
S4:获取干细胞外泌体:将步骤S3中培养后的剪碎间充质干细胞组织上清液获取,通过多重离心的方式得到干细胞外泌体;
S5:制作干细胞外泌体冻干粉:将步骤S4中得到的干细胞外泌体获取,将干细胞外泌体与淀粉按照质量比重为1:10-20的比例配比,冻干得到干细胞外泌体冻干粉;
S6:经皮下注射:使用时,将干细胞外泌体冻干粉取出并注入维生素、生理盐水和胰岛素溶化,溶化的液体药剂中维生素、生理盐水和胰岛素分别占有:维生素1μg/mg、生理盐水8-10μg/mg、胰岛素5-7μg/mg,对需要治疗的对象经皮下注射。
2.根据权利要求1所述的一种基于干细胞的毛发再生技术的方法,其特征在于:所述间充质干细胞组织来自于脐带、牙髓、脂肪、骨髓骨膜、各器官组织的血管壁或者脐带组织中的间充质干细胞组织。
3.根据权利要求1所述的一种基于干细胞的毛发再生技术的方法,其特征在于:所述步骤S1中间充质干细组织在生理盐水中预先浸泡2-3min,之后采用玻璃棒对生理盐水搅动,对其内的间充质干细胞组织清理,搅动速度为30r/min。
4.根据权利要求1所述的一种基于干细胞的毛发再生技术的方法,其特征在于:所述步骤S3中间充质干细胞组织剪碎呈尺寸为2-4mm的段状。
5.根据权利要求1所述的一种基于干细胞的毛发再生技术的方法,其特征在于:所述步骤S3中对剪碎后的间充质干细胞组织继续培养过程中,每30min对培养基及内部的剪碎间充质干细胞组织晃动,使得剪碎间充质干细胞组织充分接触氧气和营养物质。
6.根据权利要求1所述的一种基于干细胞的毛发再生技术的方法,其特征在于:所述步骤S4中多重离心的方式具体为:将上清液置于离心机中,通过设定离心机转速为400-600r/min,初步过滤去大量大颗粒细胞碎片物质;之后,设定离心机转速为800-1000r/min,得到纯净干细胞外泌体。
7.根据权利要求1所述的一种基于干细胞的毛发再生技术的方法,其特征在于:所述步骤S5中冻干方式为:降低温度至零下20-零下10℃,且冻干在无菌环境中进行,待干细胞外泌体与淀粉冷冻后,通过负压抽真空的方式将干细胞外泌体与淀粉内的水分升华分离。
8.一种基于干细胞的毛发再生技术的应用,其特征在于:该基于干细胞的毛发再生技术应用于脱发小鼠,具体如下:
S1:获取患有脱发的小鼠:将患有脱发症状的饲养小白鼠取出;
S2:按剂量经皮下注射药剂:根据小白鼠年龄、体重对小白鼠选用对应剂量的药剂并注射;
S3:观察小鼠情况:每隔7天对小白鼠注射一次药剂,期间观察小白鼠脱发处生长情况。
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