[发明专利]一种MSC的培养基添加剂及其应用

说明书

本申请属于生物技术的领域，尤其涉及一种MSC的培养基添加剂及其应用。本申请第一方面提供一种MSC的培养基添加剂，包括全反式维甲酸和γ‑干扰素。本申请第二方面公开所述培养基添加剂在提高MSC的免疫调控功能中的应用。本申请第三方面公开所述培养基添加剂在提高所述MSC的RIG‑I的表达中的应用。本申请第四方面提供了一种MSC，包括：将从体内取出组织或器官分离处理得到的MSC进行原代培养；待所述MSC贴壁后，在所述MSC的培养基中添加所述培养基添加剂继续培养，制得MSC；其中，所述的培养基添加剂包括全反式维甲酸和γ干扰素。本申请能有效解决现有技术在扩增MSC过程中存在的其免疫调控功能下降的技术问题。

技术领域

本申请属于生物技术的领域，尤其涉及一种MSC的培养基添加剂及其应用。

背景技术

间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)因具有多向分化潜能，免疫调控以及促进组织修复再生等功能，为现代医学提供了一种崭新的生物疗法。目前，与MSC相关的临床试验已经超过900项，占半数以上都是依据MSC的免疫调控的特性来治疗移植物抗宿主疾病(Graft-versus-host disease,GVHD)、膝骨关节炎、克罗恩病等自身免疫性疾病。

为了治疗临床试验中患者的疾病，往往需要使用大量的MSC。那就需要大规模体外培养扩增MSC。目前MSC的体外培养体系主要由培养基和培养条件组成。培养基为基础培养基加入5～10％胎牛血清(FBS)或人AB血清(HABS)。培养条件为根据MSC具有黏附的特性将MSC置于具有黏附性的培养皿中，并在37℃，5％氧气的低氧环境下进行培养。待光镜下看细胞聚合度达80％左右的密度可进行传代。大规模体外培养扩增功能强的MSC是目前临床试验中亟待解决的问题。

然而，在现有的体外培养条件下，MSC会随着体外培养时间的延长而功能下降，尤其是免疫调控的功能。体外扩增的MSC功能低下，成为了目前很多与MSC相关的临床试验结果和预期相距甚远的原因之一。

发明内容

有鉴于此，本申请提供了一种MSC及其制备方法和应用，能有效解决现有技术在扩增MSC过程中存在的其免疫调控功能下降的技术问题。

本申请第一方面提供了一种MSC的培养基添加剂，包括全反式维甲酸和γ-干扰素。

其中，本申请发现全反式维甲酸(All-trans retinoic acid,ATRA)和γ-干扰素(γinterferon,IFN-γ)具有能够稳定并且提高MSC免疫调节的治疗功能，为能制备具有更好免疫调控功能的间充质干细胞的一种新产品。

作为优选，所述全反式维甲酸和所述γ-干扰素的质量比为(0.3～30)：1。

本申请第二方面公开了所述培养基添加剂在提高MSC的免疫调控功能中的应用。

作为优选，所述提高MSC的免疫调控功能具体为提高所述MSC的CXCL9免疫调控分子、CCL2免疫调控分子、Nos2免疫调控分子和PD-L1免疫调控分子的表达。

本申请第三方面公开了所述培养基添加剂在提高所述MSC的RIG-I的表达中的应用。

具体的，本申请所述培养基添加剂通过作用所述MSC的RIG-I以提高所述MSC免疫调控治疗功能。

本申请第四方面提供了一种MSC，经以下步骤培养得到；

将从体内取出组织或器官分离处理得到的MSC进行原代培养；

待所述MSC贴壁后，在所述MSC的培养基中添加所述培养基添加剂继续培养，制得MSC；

其中，所述的培养基添加剂包括全反式维甲酸和γ干扰素。

作为优选，所述全反式维甲酸和所述γ-干扰素的质量比为(0.3～30)：1。