[发明专利]一种利用酚-氯仿法快速提取黄河鲤基因组DNA的方法

权利要求书

1.一种利用酚-氯仿法快速提取黄河鲤基因组DNA的方法，其特征在于具体过程为：采用涡旋震荡10s的混合方式将样品与混合试剂混合均匀，其中混合试剂为体积比25:24:1的苯酚、氯仿与异戊醇的混合溶液，再利用低温冷冻离心机在12000rpm、4℃的条件下离心2min，最终提取得到黄河鲤基因组DNA。

2.根据权利要求1所述的利用酚-氯仿法快速提取黄河鲤基因组DNA的方法，其特征在于具体步骤为：

步骤S1：用灭菌后的剪刀剪取黄河鲤新鲜鳍条组织，剪碎后置于灭菌的EP管内备用；

步骤S2：在EP管内加入组织提取液和蛋白酶K，其中组织提取液的成分为：Tris-Cl10mmol/L、EDTA 100mmol/L、NaCl 100mmol/L和SDS 0.5wt%，盖上瓶盖后颠倒混匀，再放入干式恒温器中设置温度为55℃消化过夜，直至消化澄清；

步骤S3：取出EP管将样品冷却至室温，加入混合试剂，再将EP管置于涡旋震荡器上以1500r/min的转速震荡10s充分混合均匀，然后利用低温冷冻离心机在12000rpm、4℃的条件下离心2min；

步骤S4：在EP管中加入两倍于上清液体积的提前预冷的无水乙醇，上下颠倒使得乙醇和上清液完全混合均匀，然后利用低温冷冻离心机在12000rpm、4℃的条件下离心5min；

步骤S5：弃掉上清液后加入提前预冷的体积分数为70%的乙醇进行洗涤，再利用低温冷冻离心机在12000rpm、4℃的条件下离心2min将乙醇弃掉或者用移液管将乙醇吸出；

步骤S6：开盖待乙醇完全挥发后加入灭菌的超纯水溶解过夜，并于-20℃保存备用。