[发明专利]一种硼砂硼酸缓冲液及其在电泳中的应用

说明书

本发明涉及一种硼砂硼酸缓冲液及其在电泳中的应用，属于生物技术领域。硼砂硼酸缓冲液的pH＝8.6，离子强度为0.05、0.06或0.075，所述硼砂硼酸缓冲液在电泳中的应用。优点是硼砂硼酸缓冲液使用硼砂和硼酸两种化学药品进行配制，这两种化学药品容易购买，价格便宜。缓冲液的pH容易调整，离子强度容易进行计算，适合开展血清醋酸纤维薄膜电泳和血清脂蛋白电泳实验，另外，硼砂硼酸缓冲液根据需要还可以使用在其它不同pH及不同离子强度的生命科学实验研究中。使用硼砂硼酸缓冲液效果非常好，血清醋酸纤维薄膜电泳区分出正确的蛋白质条带，而血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳也区分出脂蛋白条带，条带清晰，明确和完整，为正常开展实验研究和实验教学提供了支持。

技术领域

本发明属于属于生物技术领域，用于电泳的缓冲液，尤其涉及硼砂硼酸缓冲液及其在血清醋酸纤维薄膜和脂蛋白琼脂糖凝胶电泳中的应用。

背景技术

血清醋酸纤维薄膜电泳使用pH为8.6，离子强度为0.06的巴比妥钠/巴比妥缓冲液，血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳所用pH为8.6，离子强度分别为0.05和0.075巴比妥钠/巴比妥缓冲液。血清醋酸纤维薄膜电泳实验在医学院生物化学实验教学中非常重要，可以将血浆蛋白分为：清蛋白、α₁球蛋白、α₂球蛋白、β球蛋白和γ球蛋白；学生可以掌握电泳技术的原理，电泳必须具备的条件和影响电泳的因素等方面的知识。另外，对于掌握血清蛋白的分类和含量有重要的意义，有助于学生理解清蛋白与球蛋白比例倒置在肝硬化的诊断中的作用(正常人清蛋白/球蛋白＝1.5-2.5：1；而肝硬化清蛋白/球蛋白＝0.5：1)。血清琼脂糖凝胶电泳实验可以让学生掌握血清脂蛋白的分类、组成和功能，对于学生掌握血清脂蛋白代谢有十分重要的意义。多年来，这两个实验都使用巴比妥钠/巴比妥缓冲液，巴比妥钠为短时巴比妥类催眠药，对中枢的抑制作用随剂量增加可以达到镇静催眠的作用。巴比妥曾作为催眠药或镇静药应用于临床，但因作用弱、不良反应多、不安全、易成依赖性而被淘汰。由于巴比妥钠和巴比妥是麻醉药品和精神药品类，不能继续再使用。若没有相应的pH和离子强度的缓冲液代替，这两个实验将不能给学生再开设，学生将失去这两个验证理论知识的生物化学实验。因此找到巴比妥钠/巴比妥缓冲液的替代缓冲液就显得十分重要。

发明内容

本发明提供一种硼砂硼酸缓冲液及其在电泳中的应用，目的是使用硼砂、硼酸建立合适的pH及离子强度用于替代巴比妥钠/巴比妥缓冲液，使用在血清醋酸纤维薄膜和血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳中。

本发明采取的技术方案是：

一种硼砂硼酸缓冲液的pH＝8.6，离子强度为0.05、0.06或0.075。

一种硼砂硼酸缓冲液的配制方法，配制pH＝8.6，离子强度为0.06的硼砂硼酸缓冲液步骤是：取硼砂7.63克，硼酸3.30克，加蒸馏水溶解，终体积到1升。

一种硼砂硼酸缓冲液的配制方法，配制pH＝8.6，离子强度为0.05的硼砂硼酸缓冲液步骤是：取硼砂6.36克，硼酸2.75克，加蒸馏水溶解，终体积到1升。

一种硼砂硼酸缓冲液的配制方法，配制pH＝8.6，离子强度为0.075的硼砂硼酸缓冲液步骤是：取硼砂9.536克，硼酸4.123克，加蒸馏水溶解，终体积到1升。

本发明所述硼砂硼酸缓冲液在电泳中的应用。

本发明将醋酸纤维薄膜浸泡到pH＝8.6，离子强度为0.06的硼砂硼酸缓冲液中10-20分钟。

本发明使用pH＝8.6，离子强度为0.05硼砂硼酸缓冲液配制0.035％琼脂糖凝胶步骤是：称取琼脂糖0.035g，加入该硼砂硼酸缓冲液100ml，置微波炉中溶解，分装于三角烧瓶中，冰箱保存。

本发明使用pH＝8.6，离子强度为0.075硼砂硼酸缓冲液作为血清琼脂糖凝胶电泳槽内的缓冲液。