[发明专利]一种启动子及重组载体和用途

说明书

本发明公开了一种启动子及重组载体和用途。具有启动子功能的基因，其特征在于，所述序列如SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:8所示。所述启动子具有启动子功能，同时该启动子所示DNA序列构建的重组载体导入链霉菌，添加纤维二糖后可提高链霉菌产生天然蓝色素。

技术领域

本发明涉及基因工程领域，尤其涉及一种启动子及重组载体和用途。

背景技术

基因表达调控是基因行使功能的主要环节，而启动子是控制基因表达水平的重要调控元件。链霉菌具有产生丰富次级代谢产物的能力,能够产生多种化学结构和多样生理活性的次级代谢产物。目前，已经开发了大量的链霉菌遗传操作工具，也有一些诱导表达调控系统可供选用。但是，这些诱导表达系统均存在一定的局限性，如高水平的渗漏表达，诱导剂不稳定、易降解或有毒等(Rodríguez-García etal., 2005; Wang et al., 2013; Liet al., 2015）。因此，目前缺少一种能在链霉菌中能精确调控基因表达的诱导型表达系统。

发明内容

本发明的目的在于提供一种启动子，从而能在链霉菌中能精确调控基因表达的诱导型表达系统。

为实现上述目的，本发明提供一种具有启动子功能的基因，其特征在于，所述序列如SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:8所示。

本发明还保护所述基因或含有所述基因具有启动子功能的用途。

进一步，所述含有所述基因的序列如SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:9所示。

本发明还保护一种重组载体，其特征在于，所述重组载体含有所述基因。

进一步，所述重组载体含有所述基因为SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:8所示序列，或者SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:9所示序列。

本发明还保护一种重组细胞，其特征在于，所述重组细胞含有所述重组载体。

本发明还保护一种提高链霉菌产生天然蓝色素的方法，其特征在于，将所述重组载体转入链霉菌，添加纤维二糖。

进一步，所述链霉菌为小白链霉菌、变铅青链霉菌或天蓝色链霉菌。

进一步，所述链霉菌为小白链霉菌J1074、变铅青链霉菌TK24、天蓝色链霉菌M1146或天蓝色链霉菌M145。

本发明将CebR蛋白和cebO序列与P_kasO*组合，以卡那霉素抗性基因（neo）作为报告基因进行筛选，构建了一个无渗漏且精确控制目标基因表达的诱导表达调控系统。