[发明专利]一种用于检测血清中PF4含量的抗体对及其用途

说明书

本申请提供一种用于检测血清中PF4含量的抗体对及其用途，包括与PF4的N端表位即SEQIDNO:2所示氨基酸序列相结合的单克隆抗体AntiPF4_N和与PF4的C端表位即SEQIDNO:3所示氨基酸序列相结合的单克隆抗体AntiPF4_C，所述单克隆抗体AntiPF4_N包括SEQIDNO:7所示氨基酸序列的轻链可变区和SEQIDNO:11所示氨基酸序列的重链可变区，所述AntiPF4_C包括SEQIDNO:17所示氨基酸序列的轻链可变区和SEQIDNO:21所示氨基酸序列的重链可变区。本申请将PF4抗原分成N端(SEQIDNO:2)和C端(SEQIDNO:3)两段序列，并用这两段序列分别免疫小鼠，筛选到高特异性和高灵敏性的抗体对AntiPF4_N和AntiPF4_C，通过该抗体对可以有效的测定肝素使用后血清中PF4的含量，进而便于指导肝素的使用。

技术领域

本申请涉及医药领域，尤其涉及一种用于检测血清中PF4含量的抗体对及其用途。

背景技术

肝素是治疗和预防血栓性疾病的常用药物,在肾脏内科广泛应用于血液透析治疗。随着肝素在临床上的广泛应用,其所引起的不良反应亦日益引起人们的重视,主要包括肝素抵抗、出血、血栓形成和过敏反应,其中肝素诱导的血小板减少症(heparininducedthrom-bocytopenia,HIT)是较为严重并发症之一。HIT是由肝素类药物引起的一种以血小板减少为特征的并发症,多发于患者接受肝素治疗后的5～10d,其发生的原因是患者体内产生了针对血小板因子4(plateletfactor4,PF4)和肝素(heparin)形成的复合物的抗体(H-PF4抗体)[WARKENTINTE,CHONGBH,GREINACHERA.Heparin-inducedthrombocytopenia：towardconsensus[J].ThrombHaem-ost,1998,79：1-7.]。有研究显示,H-PF4抗体与动静脉血栓的发生有关,血液透析患者长期应用肝素进行抗凝治疗,处于形成H-PF4抗体的危险中[PENADELAVEGAL,MILLERRS,BENDAMM,etal.As-sociationofheparin-dependentantibodiesandadverseoutcomesInhemodialysispatients：apopulation-basedstudy[J].Mayo ClinProc,2005,80(8):995-1000.]。肝素是当前血液透析中常用的抗凝剂,其不良反应主要是由于体内产生了H-PF4抗体,该抗体的出现对患者透析过程中血小板下降、血栓栓塞并发症以及心脑血管事件的发生具有提示作用,并对指导透析患者肝素的合理应用和判断透析患者的远期预后具有一定的临床价值。然而，截止目前，还没有针对PF4临床检测的配对抗体序列报道。

发明内容

本申请为解决上述技术问题而提供一种用于检测血清中PF4含量的抗体对及其用途。

本申请所采取的技术方案是：本申请第一方面提供一种用于检测血清中PF4含量的抗体对，其特征在于：包括与PF4的N端表位即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列相结合的单克隆抗体AntiPF4_N和与PF4的C端表位即SEQ ID NO:3所示氨基酸序列相结合的单克隆抗体AntiPF4_C，所述单克隆抗体AntiPF4_N包括SEQ ID NO:7所示氨基酸序列的轻链可变区和SEQ ID NO:11所示氨基酸序列的重链可变区，所述AntiPF4_C包括SEQ ID NO:17所示氨基酸序列的轻链可变区和SEQ ID NO:21所示氨基酸序列的重链可变区。

进一步的，所述单克隆抗体AntiPF4_N轻链氨基酸序列包括SEQ ID NO:4所示的LCDR1或与其至少90％同源的氨基酸序列，SEQ ID NO:5所示的LCDR2或与其至少90％同源的氨基酸序列，以及SEQ ID NO:6所示的LCDR3或与其至少90％同源的氨基酸序列；所述单克隆抗体AntiPF4_N重链氨基酸序列包括SEQ ID NO:8所示的HCDR1或与其至少90％同源的氨基酸序列，SEQ ID NO:9所示的HCDR2或与其至少90％同源的氨基酸序列，以及SEQ IDNO:10所示的HCDR3或与其至少90％同源的氨基酸序列。