[发明专利]一株乳杆菌W8172及其应用

说明书

本发明公开了一种乳杆菌（lactobacillus sp.）W8172，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC NO.21788，该菌种对蜂房哈夫尼菌具有很强的抑制能力，表现出优异的益生性能；在体内实验中，喂食有乳杆菌的单菌蜜蜂对蜂房蜜蜂球菌具有较好的抑制效果；通过对乳杆菌W8172培养液的上清液的分离，发现乳杆菌W8172的分泌产物对蜂房蜜蜂球菌有抑制作用，本发明制剂环保，无污染，不会影响蜂产品品质，适用于工业化生产和市场推广应用。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种乳杆菌（lactobacillus sp.）W8172及其应用。

背景技术

蜜蜂是重要的农业授粉昆虫，其授粉作用可带来巨大的经济价值。2005年蜜蜂等昆虫为100种食用农作物传粉的价值为1530亿欧元，相当于当年食用农产品总价值的9.5%。中国是历史悠久的养蜂大国，全国现有蜂农30余万人，饲养蜂群800多万群，蜂蜜年产量占世界总产量的1/4以上。蜜蜂授粉对中国农业生产具有显著的促进作用，2006–2008年间蜜蜂授粉的年均价值高达3042.2亿元，相当于中国农业总产值的12%。然而近年来蜜蜂的健康受到很大威胁。10年前，美国养蜂者们发出警告，上万群的蜂巢出现空巢现象，蜜蜂神秘消失，这一现象被称作“蜂群衰竭失调”(collapse disorder，CCD)。2015至2016年冬天，美国蜂群的损失率为28.0%，加拿大为16.8%，欧洲为11.9%，新西兰为10.7%。然而这一问题是由包括气候变化、人类的集中化农业活动、类尼古丁类农药的施用、柴油等燃烧废气的排放等多方面原因造成的，这些因素都会影响到蜜蜂采食等相关行为，给蜂群带来威胁。

蜂房哈夫尼菌 (Hafnia alvei)是哈夫尼菌属的唯一模型株，Sakazaki曾建议哈夫尼菌属的细菌并属于肠科菌属，因此，蜂房哈夫尼菌也有蜂房变形杆菌(Enterobacter Hafnia alvei)这一名字。蜂房哈夫尼菌病是引起蜜蜂副伤寒病的主要致病菌，但大多报道于西蜂发病，具有传播速度快、危害程度严重、病程持续时间长、污染蜂产品等特点。蜜蜂感染该菌的主要症状表现为成蜂腹部膨大、行动迟缓、飞行无力、下痢等，以及肠道肿胀、呈灰白色。该病常见于湿度较大、温差变化较大季节，蜜蜂采食了含该菌的污水后感染，病蜂又污染饲料和巢脾，潜伏期3~14d，发病后蜜蜂大量死亡。另外，由于管理不善引起的盗蜂和偏集都会引起病情的扩散蔓延。

我国蜂房哈夫尼菌病鲜有报道。2016年初春，贵州某中蜂养殖场出现成蜂低飞、行动迟缓，幼蜂死亡、虫体呈乳白色、用镊子取出无拉丝和开箱有恶臭气味等症状。经判断这起蜂病由蜜蜂细菌性疾病蜂房哈夫尼菌所引起，造成当地蜂场较大经济损失。

目前蜂场在治疗时因没有有效的治疗手段，而滥用抗生素，不仅导致病源菌产生抗药性，而且会破坏蜜蜂肠道微生态平衡，使疾病进一步恶化。同时抗生素施用会导致蜂产品中残留，影响产品品质，带来食品安全性威胁。

目前未见任何关于乳杆菌用于蜂房哈夫尼菌防治的相关报道。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种乳杆菌（lactobacillus sp.）W8172，其于2021年2月1日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.21788，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

本发明乳杆菌W8172是从吉林获得的西方蜜蜂（Apis mellifera Linnaeus）中分离纯化得到的，其为革兰氏阳性菌，细胞形态为棒状，无芽胞，无鞭毛；单菌落大小为2-5mm，颜色呈灰白色，不透明，菌落表面光滑，边缘规则；菌体分别在pH值2.0、60℃水浴处理2h后存活率均大于50％、适宜于在酸性条件（pH 5.5~6.2）下生长；