[发明专利]枸杞多糖在制备抗疲劳药物、保健品或食品中的应用

说明书

本发明公开了枸杞多糖在制备抗疲劳药物、保健品或食品中的应用。分子量为92.4kDa的枸杞多糖能够明显增加肝糖原和肌糖原储备，提高超氧化物歧化酶活力，显著降低血清尿素氮、血乳酸、丙二醛水平，相较于其他分子量的枸杞多糖而言，表现出更为优异的抗疲劳作用，适用于制备抗疲劳药物、保健品或食品。

技术领域

本发明属于药物技术领域，涉及枸杞多糖在制备抗疲劳药物、保健品或食品中的应用。

背景技术

疲劳是机体在从事脑力活动或体力活动时由于消耗过大，达到一定程度时出现的一种正常的生理现象。疲劳通常会导致一系列继发性问题，例如抑郁和焦虑，同时还与认知障碍、睡眠质量差、身体机能障碍和能量失衡有关。长期疲劳会增加罹患癌症、多发性硬化症、人类免疫缺陷病毒感染和帕金森氏病的风险。消除和缓解疲劳一直以来备受运动医学、军事医学和航天医学等领域的关注。疲劳是一种复杂而普遍的生理现象，没有明确的病因，可能需要长期服药，而长期用药可能会导致一些不良反应或毒副作用。因此，找到具有明确功效且较少副作用的抗疲劳潜在药物或制剂是目前关注的重点。

枸杞为茄科植物枸杞的成熟果实，广泛分布于中国西北部、欧洲东南部和地中海干旱半干旱地区。从枸杞提取物中分离得到的枸杞多糖(L.barbarum polysaccharide，LBP)是枸杞中含量最丰富的成分之一，占干果的5％～8％，被认为是发挥生物学功效的重要组成成分。枸杞多糖因具有抗衰老、抗氧化、抗糖尿病、抗癌、细胞保护、神经保护和免疫调节等保健作用，常被作为药物和功能性食品使用。然而天然多糖分子量与其在体内的吸收和运输密切相关，从而影响生物活性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有特定分子量的枸杞多糖在制备抗疲劳药物、保健品或食品中的应用。

本发明中，所述的枸杞多糖的分子量为92.4kDa。

本发明中，所述的枸杞多糖通过以下步骤制备：

(1)将枸杞粉末在80℃下用95％乙醇回流脱脂，重复数次，收集滤渣并干燥；

(2)将干燥后的滤渣按照料液比1:30加入蒸馏水，在90℃下提取，重复数次，5℃下离心收集上清液，浓缩，加入95％乙醇分散，4℃下静置过夜，5℃下离心收集沉淀；

(3)将沉淀用蒸馏水溶解，再按体积比5:1加入Sevage试剂，充分振荡，然后在5℃下离心收集上清液，重复操作至中间无变性蛋白质层出现；

(4)将上清液减压浓缩蒸发除去残留的Sevage试剂，并在4℃下透析，将截留液冷冻干燥获得粗制枸杞多糖：

(5)然后称取粗制枸杞多糖溶于蒸馏水中，缓慢加入无水乙醇，使最终溶液的乙醇浓度为30％，于4℃静置过夜，然后5℃下离心，收集沉淀，冷冻干燥得到30％的醇沉组分LBP-Ⅰ；

(6)将LBP-Ⅰ溶于蒸馏水中，经葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱层析纯化，用蒸馏水进行洗脱，收集洗脱液，通过苯酚-硫酸法跟踪监测多糖，合并馏分，浓缩并冻干，得到纯化的分子量为92.4kDa的枸杞多糖。

优选地，步骤(1)中，脱脂时间为2h，重复次数为3次。

优选地，步骤(2)具体为：将干燥后的滤渣按照料液比1:30加入蒸馏水，在90℃下提取2h，重复2次，4000r/min、5℃下离心10min，合并上清液，浓缩至原来体积的四分之一，加入4倍体积的95％乙醇，4℃下静置过夜，4000r/min、5℃下离心10min，收集沉淀。

优选地，步骤(3)中，振荡时间为20min，离心转速为4000r/min，离心时间为10min。

优选地，步骤(4)中，透析袋的截留分子量为3500Da，透析时间为48h。

优选地，步骤(5)中，离心转速为8000r/min，离心时间为15min。