[发明专利]一种牡丹离体植株再生的方法及其应用

权利要求书

1.一种牡丹离体植株再生的方法，其特征在于，包括：

将牡丹的胚性愈伤组织置于分化培养基中，以10~11天为继代周期，继代培养11~13代得到不定芽原基；

所述分化培养基包括：

改良WPM+0.5~1mg/L CPPU+0.5~2mg/L TDZ；

将所述不定芽原基经过不定芽伸长和生根诱导得到牡丹幼苗；

所述不定芽伸长包括：

将所述不定芽原基置于不定芽伸长培养基中，以25~35天为继代周期，继代培养1~6代；

所述不定芽伸长培养基包括：改良WPM+0.2~0.3mg/L BA+0.1~0.2mg/L GA₃；

所述生根诱导包括：

将经过伸长的不定芽置于根诱导培养基中，诱导生根25~35天，再转接到根伸长培养基中，诱导根伸长15~25天得到牡丹幼苗；

所述根诱导培养基包括：1/2MS+1.0 mg/L IBA+1.0 mg/L 腐胺；

所述根伸长培养基包括：1/2MS+0.4 g/L AC；

所述改良WPM的配方为：

大量元素：CaCl₂·2H₂O 96mg/L、Ca(NO₃)₂.4H₂O 1668mg/L、KH₂PO₄ 170mg/L、K₂SO₄990mg/L、MgSO₄·7H₂O 370mg/L、NH₄NO₃ 400 mg/L；有机成分：Myo-Inositol 100mg/L、Nicotinic acid 0.5mg/L、Pyridoxine HCl VB6 0.5mg/L、Thiamine HCl VB1 1mg/L和Glycine 2mg/L；微量元素：CuSO₄·5H₂O 0.25mg/L、Na₂EDTA 37.3mg/L、FeSO₄·7H₂O27.8mg/L、H₃BO₃ 6.2mg/L、MnSO₄·4H₂O 22.5mg/L、Na₂MoO₄·2H₂O 0.25mg/L和ZnSO₄·7H₂O8.6mg/L。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述分化培养基由如下组分组成：

改良WPM+0.5mg/L CPPU+0.5mg/L TDZ；

所述改良WPM的配方为：

大量元素：CaCl₂·2H₂O 96mg/L、Ca(NO₃)₂.4H₂O 1668mg/L、KH₂PO₄ 170mg/L、K₂SO₄990mg/L、MgSO₄·7H₂O 370mg/L、NH₄NO₃ 400 mg/L；有机成分：Myo-Inositol 100mg/L、Nicotinic acid 0.5mg/L、Pyridoxine HCl VB6 0.5mg/L、Thiamine HCl VB1 1mg/L和Glycine 2mg/L；微量元素：CuSO₄·5H₂O 0.25mg/L、Na₂EDTA 37.3mg/L、FeSO₄·7H₂O27.8mg/L、H₃BO₃ 6.2mg/L、MnSO₄·4H₂O 22.5mg/L、Na₂MoO₄·2H₂O 0.25mg/L和ZnSO₄·7H₂O8.6mg/L。