[发明专利]一种从发酵液中提取分离咖啡酸的方法有效
申请号: | 202110514617.5 | 申请日: | 2021-05-12 |
公开(公告)号: | CN113173848B | 公开(公告)日: | 2022-02-18 |
发明(设计)人: | 孙磊;王浩 | 申请(专利权)人: | 南京合谷生命生物科技有限公司 |
主分类号: | C07C51/42 | 分类号: | C07C51/42;C07C59/52 |
代理公司: | 南京聚匠知识产权代理有限公司 32339 | 代理人: | 许松 |
地址: | 210000 江苏省南京市江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 发酵 提取 分离 咖啡 方法 | ||
1.一种从发酵液中提取分离咖啡酸的方法,其特征在于,其特征在于,具体包括以下步骤:
(1)陶瓷膜过滤:将含有咖啡酸的发酵液水浴升温至75~90℃,在速度为200~400rpm下充分搅拌30~60min,后经孔径为10nm的陶瓷膜过滤、冲洗,收集过滤液,得到滤液A;
(2)纳滤膜纳滤:将上述的滤液A经截留分子量200D~800D的纳滤膜进行纳滤、冲洗,控制纳滤压力在2MPa以内,收集透过液,得到透过液B;
(3)活性炭脱色:向上述的透过液B加入为透过液重量0.25~1.5%的活性炭,水浴升温至50~80℃后进行脱色1~3h,后经抽滤瓶抽滤收集脱色的液体,得到脱色液C;
(4)旋转蒸发浓缩:将上述的脱色液C置于温度为65~75℃条件下旋蒸进行浓缩,回收旋蒸出来的水溶剂,并得到浓缩液D;
(5)低温结晶:将上述浓缩液D置于温度为1~10℃的条件下进行低温冷却结晶,结晶时间为10~14h,得到结晶物E;
(6)离心分离:将结晶物E进行离心分离,后干燥,得到咖啡酸产品;
所述含有咖啡酸的发酵液为重组大肠杆菌产酶催化底物对香豆酸得到的固液混合物;所述固液混合物中的咖啡酸含量为9.85~10.15g/L。
2.根据权利要求1所述的一种从发酵液中提取分离咖啡酸的方法,其特征在于,在步骤(3)中,所述纳滤膜为截留分子量300D纳滤膜。
3.根据权利要求1所述的一种从发酵液中提取分离咖啡酸的方法,其特征在于,在步骤(4)中,所述浓缩液D中可溶固体的重量(kg)与浓缩液D的体积(L)之比为1:6~12。
4.根据权利要求3所述的一种从发酵液中提取分离咖啡酸的方法,其特征在于,步骤(4)中旋蒸回收的水溶剂为步骤(1)、步骤(2)中冲洗用的冲洗液,或者用于制备含有咖啡酸的发酵液。
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