[发明专利]一种利于镜下观察胚胎发育的鱼类粘性受精卵处理方法

权利要求书

1.一种利于镜下观察胚胎发育的鱼类粘性受精卵处理方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、取样，人工鱼巢上小心地取下10个左右鱼类受精卵置于培养皿中并放入到无菌恒温箱内进行放置；

S2、一次脱粘处理，从无菌恒温箱内取出盛放有鱼类受精卵的培养皿并倒入一号脱粘液，一号脱粘液倒入至淹没鱼类受精卵，静置一段时间；

S3、一次脱粘震荡，将一号脱粘液淹没的培养皿放入到恒温摇床，并在一定温度下进行慢速震荡一段时间；

S4、二次脱粘前处理，利用抖动滤网对一次脱粘震荡后的培养皿进行抖动过滤，倒去一号脱粘液得到鱼类受精卵；

S5、二次脱粘处理，将二号脱粘液倒入到去除一号脱粘液的培养皿中，静置一段时间；

S6、二次脱粘震荡，将二号脱粘液倒入后的培养皿放入到恒温摇床，并在一定温度下进行慢速震荡一段时间；

S7、显微观察，将二次脱粘震荡后的培养皿放入到显微镜上进行显微镜观察。

2.根据权利要求1所述的一种利于镜下观察胚胎发育的鱼类粘性受精卵处理方法的制备方法，其特征在于，所述S2中，一号脱粘液由0.003g尿素和0.004gNaCl溶解于0.1g水中组成，并静置在20℃-25℃的恒温水浴锅中进行恒温处理。

3.根据权利要求1所述的一种利于镜下观察胚胎发育的鱼类粘性受精卵处理方法的制备方法，其特征在于，所述S3中，对一号脱粘液淹没的培养皿进行震荡处理时的温度为在20℃-25℃，震荡时间60-90min。

4.根据权利要求1所述的一种利于镜下观察胚胎发育的鱼类粘性受精卵处理方法的制备方法，其特征在于，所述S5中，往培养皿中倒入的二号脱粘液体积具体为一号脱粘液加入量的五倍。

5.根据权利要求1所述的一种利于镜下观察胚胎发育的鱼类粘性受精卵处理方法的制备方法，其特征在于，所述S5中，二号脱粘液由0.008g-0.009g尿素溶解于0.5g水中组成，并静置在20℃-25℃的恒温水浴锅中进行恒温处理。

6.根据权利要求1所述的一种利于镜下观察胚胎发育的鱼类粘性受精卵处理方法的制备方法，其特征在于，所述S6中，对二号脱粘液淹没的培养皿进行震荡处理时的温度为在20℃-25℃，震荡时间30-60min。

7.根据权利要求1所述的一种利于镜下观察胚胎发育的鱼类粘性受精卵处理方法的制备方法，其特征在于，所述S2和所述S5中，加入一号脱粘液的培养皿静置时间和加入二号脱粘液的培养皿静置时间均为15min。