[发明专利]一种太子参标准对照物质及其分离纯化方法和检测方法

说明书

本申请公开了一种太子参标准对照物质及其分离纯化方法和检测方法，该分离纯化方法可有效稳定地制备太子参标准对照物质，本申请所制备的太子参标准对照物质同时含有7个成分，评价含太子参药材、饮片、配方颗粒或太子参药物及其制剂的质量时，可用作标准对照。

技术领域

本申请涉及一种太子参标准对照物质及其分离纯化方法和检测方法，属于中医药技术领域。

背景技术

太子参是石竹科植物孩儿参Pseudostellaria heterophylla(Miq.)Pax ex Paxet Hoffm.的块根，另有童参、四叶参、米参等别称，属于补虚补气药，可益气健脾，生津润肺。太子参的栽植区域分布范围广，主要有福建、江苏、山东、安徽等地，其中福建柘荣素有“太子参之乡”的美誉，其生产基地也已通过国家GAP验收认证。太子参富含多糖、环肽、蛋白质、磷脂和氨基酸等，现代研究表明太子参具有优异的生物活性，如降低血糖血脂、抗应激、调节免疫系统功能、抗氧化、保护心肌、改善记忆障碍和缓解疲劳。2016年，太子参被卫生部列入“可用于保健食品的物品”名单，对太子参功能成分的研究及其在食品领域的开发越来越得到重视。

太子参的功能成分：

(1)糖类：太子参中多糖含量丰富，由于其原产地差异，多糖含量波动较大，其分布范围为6.45％～20.55％。太子参中的多糖主要由葡萄糖、果糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖和半乳糖醛酸组成，来源不同其单糖比例也明显不同。目前从太子参中分离纯化得到的均一多糖主要有太子参多糖PHP-A、PHP-B、H-1-1、H-1-2和0.5MSC-F。其中，PHP-A和PHP-B是利用热水提取法、柱层析分离技术从太子参中分离得到的两个葡聚糖，PHP-A以α型糖苷键为主要糖苷键、平均分子量为3.2×10⁴Da，PHP-B以β型糖苷键为主要糖苷键、平均分子量为4.6×10⁴Da。H-1-1是通过水提醇沉、DEAE-纤维素、葡聚糖凝胶柱从太子参中提取纯化得到的均一多糖，由葡萄糖组成，分子量为1.8×10⁴Da。H-1-2、0.5MSC-F是由Chen等从太子参中分离得到，H-1-2是平均分子量为1.4×10⁴Da的葡聚糖；0.5MSC-F是以半乳糖醛酸为主要单糖、分子量为4.8×10⁴Da的水溶性果胶多糖，太子参多糖H-1-2和0.5MSC-F都具备降低血糖的生物活性。

(2)氨基酸、环肽类和蛋白质：太子参中氨基酸含量丰富，其中以精氨酸、谷氨酸、γ-氨基丁酸和天冬氨酸含量较高，且种植型太子参的精氨酸含量低于野生型。环肽类是石竹科植物的特征性成分，具有酪氨酸酶抑制活性，其结构相对于线性肽更稳定，能够更好地发挥其生物活性。目前，已从太子参中分离得到17种环肽(Heterophyllin A-J，Pseudostellarins A-H)，由2～10个氨基酸组成，均属典型的石竹科类环肽。蛋白质也是太子参中的主要成分之一，含量约为16％，且主要为糖蛋白。利用iTRAQ定量蛋白质组学技术对太子参蛋白质组成进行分析发现，太子参中含有3775种蛋白质，通过质谱、蛋白质鉴定及相对定量发现，ADG1和TKTA可能是调节不同产地太子参蔗糖差异的两个关键蛋白，MFP2是导致不同产地太子参脂肪酸变化的关键蛋白。

(3)其他功能成分

磷脂类和脂肪酸类，太子参中磷脂的含量占总干重的5.5％，主要成分有磷脂酰胆碱、磷脂酸、磷脂酰肌醇等。太子参中脂肪酸类成分主要有棕榈酸、二十四碳酸、十八碳酸、琥珀酸等。

皂苷类，相较于其他成分，太子参中皂苷类成分含量较低，主要含太子参皂苷A(Pseudotellarinoside A)、尖叶丝石竹皂苷D、胡萝卜苷、Δ7-3β-豆甾烯醇-3-O-β-D-葡萄糖苷等。刘光海等对贵州不同地区太子参中的皂苷含量进行测定，发现其总皂苷含量在0.20％～0.70％，含量差异不大。