[发明专利]一种能够调节细胞生长状态的细胞培养载体

权利要求书

1.一种能够调节细胞生长状态的细胞培养载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：

制备大尺寸氧化石墨烯分散液：按照Hummers法或改进Hummers法制备氧化石墨，在进行到双氧水还原残留氧化剂的步骤后，静置取下层，分别用去离子水和稀HCl溶液洗涤后，透析至中性制得大尺寸氧化石墨烯分散液；

步骤2：

（1）调整大尺寸氧化石墨烯分散液的浓度，制备成氧化石墨烯墨水，将氧化石墨烯墨水打印在衬底上，冷冻后在冷冻干燥机中进行真空冷冻干燥6~10h，得到氧化石墨烯气凝胶；所述氧化石墨烯墨水的浓度为6~36mg/L，真空冷冻干燥温度为-45~-60℃；

（2）将氧化石墨烯气凝胶进行化学还原，还原后取出自然冷却，洗涤至中性，烘干后得到不同杨氏模量的石墨烯气凝胶，附着了石墨烯气凝胶的衬底为所制备的能够调节细胞生长状态的细胞培养载体。

2.根据权利要求1所述的能够调节细胞生长状态的细胞培养载体的制备方法，其特征在于，通过调节所述步骤2（1）中的氧化石墨烯墨水的浓度或/和真空冷冻干燥温度，调整石墨烯气凝胶的杨氏模量。

3.根据权利要求2所述的能够调节细胞生长状态的细胞培养载体的制备方法，其特征在于，所述将氧化石墨烯墨水打印在衬底上，是将氧化石墨烯墨水打印成设计好的特定形状；制成的细胞培养载体中，所述特定形状各部分的石墨烯气凝胶杨氏模量相同或不同。

4.根据权利要求1所述的能够调节细胞生长状态的细胞培养载体的制备方法，其特征在于，所述衬底为等离子体亲水处理过的PET膜、聚二甲基硅氧烷、玻璃或硅片。

5.根据权利要求1所述的能够调节细胞生长状态的细胞培养载体的制备方法，其特征在于，所述步骤2（2）中，化学还原过程为将氧化石墨烯气凝胶浸入HI水溶液中，HI水溶液质量浓度为15%，加热温度为90~95℃，持续3~4h。

6.根据权利要求1所述的能够调节细胞生长状态的细胞培养载体的制备方法，其特征在于，所述氧化石墨烯墨水的浓度为12~30mg/L。

7.一种能够调节细胞生长状态的细胞培养载体，其特征在于，采用权利要求1至6中任一项所述的制备方法制备。

8.权利要求7所述的能够调节细胞生长状态的细胞培养载体的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）从液氮中将冻存的细胞取出后，固定在 37℃水浴锅内进行细胞复苏；

（2）在细胞完全融化前取出，加入细胞培养液离心后，取底部细胞沉积物，摇匀后加入细胞培养液移入培养瓶中，放置入细胞培养箱中进行培养；

（3）将培养液和培养好的细胞移入装有所述能够调节细胞生长状态的细胞培养载体的细胞培养皿中，使细胞在培养载体上生长。

9.根据权利要求8所述的能够调节细胞生长状态的细胞培养载体的使用方法，其特征在于，所述细胞为L929细胞、A7r5细胞、LS8细胞的一种或几种。