[发明专利]一种提高大鲵肽生物活性的方法、大鲵肽糖基化产物及应用

说明书

本发明提供了一种提高大鲵肽生物活性的方法、大鲵肽糖基化产物及应用，涉及肽修饰技术领域。本发明所述方法利用转谷氨酰酶将脱乙酰基的透明质酸结合到大鲵肽上，获得大鲵肽糖基化产物，进而达到提高大鲵肽的抑制酪氨酸酶活性和促进人皮肤成纤维细胞生长的目的。同时，脱乙酰基的透明质酸修饰大鲵肽具有较好的人体皮肤细胞的亲和性，在医药和化妆品领域中有着广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于肽修饰技术领域，具体涉及一种提高大鲵肽生物活性的方法、大鲵肽糖基化产物及应用。

背景技术

大鲵肽是大鲵蛋白经蛋白酶水解后获得的低分子量产物。大鲵肽具有很强的抗氧化活性。肽通过修饰的方法，可以提高肽的生物活性。如夏春荣等利用转谷氨酰胺酶进行D-氨基半乳糖修饰玉米肽制备出了玉米糖肽，使玉米肽的抗氧化活性得到显著提高(夏春荣，王晓杰，姜宇航，等.D-氨基半乳糖糖基化修饰玉米肽抗疲劳效应的研究.中国粮油学报，2021.02)。利用酶法进行肽的糖基化修饰具有反应特异性强、反应条件温和、反应产物应用安全的优点。

将小分子透明质酸等通过电子注射器即水光疗法注射到皮肤，是近年来流行的微整形治疗方法。其机制是将小分子透明质酸均匀地注射到皮肤真皮层，利用其结合水分子特性，促进代谢物和色素排出的作用，达到改善皮肤质地的效果。相比较而言，低分子量透明质酸表现出较强的生物活性，且更易于渗透到真皮中。

目前尚未见到利用小分子透明质酸修饰大鲵肽，以期获得具有更好的美白保湿作用的透明质酸修饰大鲵肽的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种提高大鲵肽生物活性的方法、大鲵肽糖基化产物及应用，利用透明质酸修饰大鲵肽，从而提高大鲵肽的生物活性，并具有较好的人体皮肤细胞的亲和性。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种提高大鲵肽生物活性的方法，包括以下步骤：将脱乙酰基的透明质酸与大鲵肽溶液和转谷氨酰酶混合进行糖基化反应，得大鲵肽糖基化产物。

优选的，所述脱乙酰基的透明质酸的制备方法，包括：将透明质酸与几丁质脱乙酰基酶混合反应12h，反应结束后，向反应体系中加入乙醇，至乙醇体积为总体系体积60～80％，离心，干燥沉淀得脱乙酰基的透明质酸。

优选的，所述透明质酸的相对分子量小于1×10⁵Da。

优选的，所述几丁质脱乙酰基酶的质量为所述透明质酸质量的1％；所述混合反应的温度为45℃，pH值为7.0～8.0。

优选的，所述脱乙酰基的透明质酸与大鲵肽溶液中的大鲵肽的质量比为(1～2):1；

所述转谷氨酰酶的质量为所述脱乙酰基的透明质酸和大鲵肽溶液中大鲵肽的总质量的1％。

优选的，在所述糖基化反应后，还包括离心、过滤、冻结后干燥；

所述离心的转速为4000r/min，离心的时间为15min，筛选上清液中截留分子量不超过300Da的成分，冻结后冷冻干燥。

本发明还提供了利用上述方法制备得到的提高大鲵肽生物活性的大鲵肽糖基化产物。

本发明还提供了利用上述方法制备得到的大鲵肽糖基化产物或上述大鲵肽糖基化产物在制备美白、保湿和抗氧化的试剂中的应用。

优选的，所述试剂包括食品、药品或化妆品。

本发明还提供了一种具有美白、保湿和抗氧化作用的试剂，所述试剂的有效成分选自利用上述方法制备得到的大鲵肽糖基化产物或权上述大鲵肽糖基化产物。