[发明专利]同时检测小麦抗赤霉病基因与抗白粉病基因的多重PCR标记引物组及其应用

权利要求书

1.同时检测小麦抗赤霉病基因Fhb1与抗白粉病基因Pm21的多重PCR标记引物组，其特征在于，该引物组包括：核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的前引物F1、核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示的前引物F2、核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的后引物R1、核苷酸序列如SEQ IDNO.4所示的后引物R2。

2.如权利要求1所述多重PCR标记引物组在检测小麦抗赤霉病基因Fhb1与抗白粉病基因Pm21中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述应用是指：以小麦基因组DNA为模板，以核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.4所示的引物组进行PCR扩增后电泳，若出现大小为454bp的条带，则判定该小麦携带小麦抗赤霉病基因Fhb1；若出现大小为267bp 的条带，则判定该小麦携带抗白粉病基因Pm21；同时若出现大小为454bp和267bp 两个条带，则判定该小麦同时携带小麦抗赤霉病基因Fhb1与抗白粉病基因Pm21。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述PCR扩增是指：

扩增体系：2×Rapid Taq Master Mix 5 µl，浓度为10 µM的引物各0.25 µl，浓度为50ng μL^‒1的模板 DNA 3 µl，ddH₂O补足至10 µl；所述引物核苷酸序列依次如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.4所示；

PCR扩增程序：第一步：94℃，3 min；第二步：94˚C 15 s，58˚C 30 s，72˚C 30 s延伸，35个循环；第三步：72˚C延伸5 min。