[发明专利]一种具有偶联凝集素的琼脂糖凝胶的制备方法及试剂盒在审
| 申请号： | 202110519041.1 | 申请日： | 2021-05-12 |
| 公开（公告）号： | CN113311167A | 公开（公告）日： | 2021-08-27 |
| 发明（设计）人： | 罗辉 | 申请（专利权）人： | 广州一步医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/53 |
| 代理公司： | 成都佳划信知识产权代理有限公司 51266 | 代理人： | 幸伟山 |
| 地址： | 510000 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 具有 凝集素 琼脂 凝胶 制备 方法 试剂盒 | ||
1.一种具有偶联凝集素的琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将1-10g的活化琼脂糖凝胶6B移入砂蕊漏斗内，并采用0.1-100mM的HCl溶液进行洗涤，待用；
将1-100mg的独角仙凝集素AlloA溶于1-20ml的偶联缓冲液，并与洗涤后的琼脂糖凝胶6B进行合并，室温反应4h；
以10-500ml的偶联缓冲液洗去未经过偶联的独角仙凝集素AlloA，测定洗涤液中的独角仙凝集素AlloA含量，计得偶联率为95％；
采用0.1-10mol/L的甘氨酸封闭琼脂糖凝胶6B剩余活化基团；
采用剂量为10-100mL、且浓度为0.01-0.2mol/L Tris-盐酸缓冲液洗涤封闭后的琼脂糖凝胶6B 3次，得到偶联凝集素的琼脂糖凝胶6B。
2.根据权利要求1所述的一种具有偶联凝集素的琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将2g的琼脂糖凝胶移入砂蕊漏斗内，并采用400mL 1mM的HCl溶液进行洗涤，待用；
将10g的独角仙凝集素AlloA溶于5mL的偶联缓冲液，并与洗涤后的琼脂糖凝胶进行合并，室温反应4h；
以20mL的偶联缓冲液洗去未经过偶联的独角仙凝集素AlloA，测定洗涤液中的独角仙凝集素AlloA含量，计得偶联率为95％；
采用0.5mol/L的甘氨酸封闭琼脂糖凝胶6B剩余活化基团；
采用剂量为20mL、浓度为0.02mol/L的Tris-盐酸缓冲液洗涤封闭后的琼脂糖凝胶6B 3次，得到偶联凝集素的琼脂糖凝胶。
3.根据权利要求1或2所述的一种具有偶联凝集素的琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，所述ris-盐酸缓冲液内含有0.8mol/L的NaCl。
4.根据权利要求1或2所述的一种具有偶联凝集素的琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，所述琼脂糖凝胶为经CNBr活化或环氧活化或NHS活化的琼脂糖凝胶4B或脂糖凝胶6B或脂糖凝胶FF。
5.根据权利要求4所述的一种具有偶联凝集素的琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，所述琼脂糖凝胶为琼脂糖凝胶6B。
6.根据权利要求1或2所述的一种具有偶联凝集素的琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，所述偶联缓冲液为凝集素的活性保护液；所述偶联缓冲液内含有1mmol/L的CaCl2、1mmol/L的MgCl2、1mmol/L的MnCl2和20mmol/L的Tris-HCL；所述偶联缓冲液的PH值为7.4。
7.一种采用1～6任一项所述的具有偶联凝集素的琼脂糖凝胶的制备方法制备的试剂盒，其特征在于，由上部分离管和下部收集管组成；所述上部分离管装有偶联亲和素的亲合介质；所述上部分离管的顶部设置有一滤膜；所述偶联亲和素为β-D-半乳糖苷特异性凝集素；所述亲合介质为具有偶联凝集素的琼脂糖凝胶。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于广州一步医疗科技有限公司，未经广州一步医疗科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110519041.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
