[发明专利]一种用于预测P2Y12受体拮抗剂抗血小板疗效的circRNA检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种用于预测P2Y12受体拮抗剂抗血小板疗效的circRNA检测试剂盒及其应用。所述circRNA检测试剂盒包括检测血小板circFAM13B相对表达量的试剂；所述检测血小板circFAM13B相对表达量的试剂包括circFAM13B扩增引物、反转录反应试剂和荧光定量PCR反应试剂；所述circFAM13B扩增引物由序列表中序列2所示的单链DNA分子和序列表中序列3所示的单链DNA分子组成。本发明提供的试剂盒制备简单、使用方便，可快速准确预测中国患者人群的P2Y12受体拮抗剂抗血小板反应性，为P2Y12受体拮抗剂个体化抗血小板治疗提供表观遗传学参考指标。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及血小板circFAM13B作为标记物在制备预测P2Y12受体拮抗剂抗血小板疗效的产品中的应用，特别涉及检测血小板circFAM13B表达量的物质在制备P2Y12受体拮抗剂抗血小板疗效的产品中的应用。

背景技术

急性冠状动脉综合征(ACS)是严重危害人类健康的常见心血管疾病之一，尽管过去十年ACS的死亡率已大大降低，且冠心病的年死亡率下降了34.4％，但经历复发事件的患者死亡风险仍较高。P2Y12受体拮抗剂联合阿司匹林抗血小板治疗是目前公认的ACS标准治疗和预防经皮冠脉介入(PCI)术后支架内血栓形成的金标准。研究证实，P2Y12受体拮抗剂抗血小板反应性具有个体差异，造成P2Y12受体拮抗剂抗血小板反应性的个体差异因素包括疾病状态、合并用药及药物剂量，以及药物基因组学因素(CYP2C19基因多态性)。然而，已知的这些因素尚不足以解释血小板反应性的个体差异。因此，如何在临床预测P2Y12受体拮抗剂抗血小板反应性差异，实现ACS患者个性化的抗血小板药物治疗，一直是心血管临床药理领域研究的热点和亟待解决的难题。为此，有必要探索新的生物标记物弥补药物基因组学研究中基因型、表型和疾病之间关联性的缺失。

近年来，对血小板的表观遗传学研究发现，血小板中除了信使RNA(mRNA)外，还含有丰富的非编码RNA，尤其是小RNA(microRNA)和环状RNA(circRNA)。Sanger HL在1976年首次在病毒中发现circRNA。随后，针对circRNA的研究逐渐开展，近年来更是备受关注。研究发现，血小板中富含circRNA，并主要以外显子环化的剪切形式产生并存在。由于circRNA比线性RNA更稳定，且circRNA的闭环末端结构可以保护其免受核酸外切酶的降解，因此其具有作为临床生物标记物的潜力。已有研究发现，circRNA与动脉粥样硬化、心肌梗死、心力衰竭等疾病均有相关性。但是，血小板circRNAs与血小板反应性以及在血小板中的调控机制尚不知晓。

发明内容

本发明的目的在于提供血小板源性circFAM13B作为标记物在预测P2Y12受体拮抗剂抗血小板疗效中的应用。

为了实现上述目的，本发明首先提供了检测血小板circFAM13B表达量的物质在如下(a1)-(a4)中任一种中的应用：

(a1)预测P2Y12受体拮抗剂抗血小板治疗疗效；

(a2)制备预测P2Y12受体拮抗剂抗血小板治疗疗效的产品；

(a3)预测P2Y12受体拮抗剂抗血小板反应性；

(a4)制备预测P2Y12受体拮抗剂抗血小板反应性的产品。

上述应用中，所述P2Y12受体拮抗剂为氯吡格雷或替格瑞洛。

上述应用中，所述检测血小板circFAM13B表达量的物质包括检测血小板circFAM13B相对表达量的试剂和/或仪器；

所述检测血小板circFAM13B相对表达量的试剂具体包括circFAM13B扩增引物、反转录反应试剂和荧光定量PCR反应试剂。

进一步的，所述circFAM13B扩增引物由序列表中序列2所示的单链DNA分子和序列表中序列3所示的单链DNA分子组成。