[发明专利]从沙棘果渣中分离制备三种三萜酸类化合物的方法

说明书

本发明提供了对于沙棘果渣中三萜酸类化合物的分离制备方法，主要包括对于三萜酸类部位的提取纯化，同时还采用了特定条件的色谱方法进行纯化分离。本发明通过特定的方法和条件，首次同时从沙棘果渣中有效分离出两组三萜酸类同分异构体化合物，为沙棘果渣的进一步研究和利用提供了可能。

技术领域

本发明涉及天然植物化学领域。

背景技术

目前，我们对沙棘产品的开发、研制和生产多数集中在沙棘果和沙棘叶两个部位，而随着人们对健康问题的重视日渐加深，保健食品的开发有着广阔的市场和突出的潜力。目前，沙棘果主要应用于果汁的生产，沙棘叶主要应用于药品和茶叶的生产，沙棘果榨汁产生大量的果渣被视为次级加工产物而被丢弃，大量的营养物质也随着损失。据报道，我国每年沙棘产业生产沙棘产品后，产生的沙棘果渣有几百万吨。如果不对其加强重视，不进行综合利用，将会造成大量天然产物资源的浪费等。因此，沙棘果渣的充分利用成为一个新的研究热点。加大沙棘果渣活性成分的研究和生产，有利于推动沙棘果渣资源的深层次利用和提高沙棘类食品的附加值，在变废为宝，节能减排，推动经济等方面具有重要意义。

发明人前期发现了沙棘果渣中含有多种三萜酸类成分，经过实验表明，沙棘果渣中的三萜酸类提取部位，具备良好的护肝等功效，具备保健品开发价值。但是，更深层次的单体化合物研究目前还在不断的进行中。

发明内容

为了更好的对沙棘果渣中活性成分进行深入研究，本发明拟提供对于沙棘果渣中三萜酸类化合物的分离制备方法。

发明人在研究中发现，沙棘果渣中含有多种三萜酸类同分异构体，然而，同分异构体因为其结构极为近似，导致不易被分离、检测。

本发明经过多次尝试，最终提供了如下所示化合物4的制备方法，它包括如下内容：

(1)取沙棘果渣，醇提水沉，取沉淀部分上C18柱，依次使用20％±5、60％±5、80％±5甲醇水溶液、纯甲醇进行洗脱，取纯甲醇洗脱部位的第一个黄色色带部分；

(2)黄色色带上C18制备色谱，甲醇-水溶液80-90:20-10v/v等度洗脱，流速：14-18mL/min，收集29-50min洗脱液，除去溶剂得到馏分F4-2；

(3)取馏分F4-2上C18制备色谱，洗脱程序：A-水，B-乙腈，0-17.5min65％-72％B，17.5-20min 72％-73％B，20-40min 73％-77％B，40-60min 77％-100％B，流速：14-18mL/min；从7个明显强峰中，取第5个色谱峰，除去溶剂，得到如下结构化合物4：

      

其中，步骤(1)中，醇提水沉选用85％v/v以上乙醇。

进一步地，步骤(1)中，醇提水沉选用95％v/v以上乙醇。

其中，步骤(2)、(3)制备色谱中，检测波长为210nm。

进一步地，步骤(2)所用制备色谱柱选自Xaqua C18，250×21.2mm，5μm。

进一步地，步骤(3)所用制备色谱柱选自Kromasil C18，250×21.2mm，5μm。

进一步地，步骤(2)中采用甲醇-水溶液85:15v/v等度洗脱。

进一步地，步骤(2)、(3)中，洗脱流速可以选自15、16、17mL/min等。

本发明还提供了如下所示化合物5的制备方法，它包括如下内容：

(1)取沙棘果渣，醇提水沉，取沉淀部分上C18柱，依次使用20％±5、60％±5、80％±5甲醇水溶液、纯甲醇进行洗脱，取纯甲醇洗脱部位的第一个黄色色带部分；