[发明专利]一种重组Protein A蛋白及亲和层析介质的制备方法有效

专利信息
申请号: 202110525261.5 申请日: 2021-05-11
公开(公告)号: CN113278052B 公开(公告)日: 2022-09-09
发明(设计)人: 张洪 申请(专利权)人: 博格隆(浙江)生物技术有限公司
主分类号: C07K14/00 分类号: C07K14/00;C07K1/22;B01J20/281;B01J20/30
代理公司: 北京劲创知识产权代理事务所(普通合伙) 11589 代理人: 田亚飞
地址: 314200 浙江省嘉兴*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 重组 protein 蛋白 亲和 层析 介质 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种重组Protein A蛋白,其特征在于,所述的重组Protein A蛋白是由包含SEQIDNo 1指定的E结构域的突变体,所述突变体包含4个重复单元,其序列选自:

SEQ ID No 43、SEQ ID No44或SEQ ID No 45。

2.根据权利要求1所述的一种重组Protein A蛋白,其特征在于,所述重组Protein A蛋白C端包含一个半胱氨酸残基的偶联基团。

3.一种亲和层析介质的制备方法,其特征在于,该亲和层析介质的配基为权利要求1所述的重组Protein A蛋白,该亲和层析介质的制备方法包括以下步骤:

S1、合成重组Protein A蛋白的基因;

S2、利用所述S1中合成的基因分别构建表达载体;

S3、培养并表达纯化得到序列对应的SEQ ID的重组Protein A溶液;

S4、利用所述重组Protein A制备得到亲和层析介质。

4.根据权利要求3所述的一种亲和层析介质的制备方法,其特征在于,所述S2中的表达载体为PET23a。

5.根据权利要求3所述的一种亲和层析介质的制备方法,其特征在于,所述S3中培养并表达纯化得到对应序列的重组Protein A溶液具体包括以下步骤:

S31、利用单个重组质粒转化到大肠杆菌,并通过LB液体培养基进行发酵培养并进行诱导表达;

S32、发酵后,收集菌体并采用热裂解的方式破坏细胞壁将表达产物释放出来并离心分离;

S33、将分离液体经过IgG亲和介质进行纯化。

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