[发明专利]一种快速建立小鼠心肌梗死模型的改进方法

权利要求书

1.一种快速建立小鼠心肌梗死模型的改进方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1：准备实验动物，准备SPF级昆明小鼠n只，雌雄各半，6-10周龄，体重25-35克；

S2：呼吸麻醉装置制作，连接氧气袋和雾化吸入药瓶制作成为呼吸麻醉装置，将清洁棉球放置到雾化药物瓶的瓶底；

S3：取下面罩，将小鼠的脑袋塞进药物瓶吸嘴里，通过调节氧气袋的阀门控制进入药瓶的氧气速度和氧气量，再使用5ml注射器吸取0.5ml异氟烷由药瓶盖上的空隙添加到棉球上，直至浸有异氟烷的的棉球在药瓶底部挥发进入吸嘴，同时通过氧气袋给氧，直至小鼠达到稳定的麻醉状态。

2.根据权利要求1所述的快速建立小鼠心肌梗死模型的改进方法，其特征在于：S3中，将氧气袋阀门开到最大，再将刚注射了异氟烷的药瓶吸嘴套在小鼠脑袋上，1-2min后小鼠便出现瘫软无力，此时固定小鼠四肢和尾巴呈仰卧位，再将阀门开到中间，维持小鼠呼吸平稳，直至小鼠进入稳定麻醉状态。

3.根据权利要求1所述的快速建立小鼠心肌梗死模型的改进方法，其特征在于：还包括S4:(1)备皮：将已经固定好的小鼠左胸壁上的毛用剃毛刀剃干净，再用碘伏消毒；

(2)皮肤切口：在3-4肋间隙位置，垂直于胸骨与腋前线做一横行切口，切口约1.5cm；

(3)荷包缝合：沿着切口用3-0缝合线打一个荷包缝合松结备用；

(4)暴露3-4肋间隙：沿切口处逐层剪开肌肉，显露出3-4肋间隙，此时即可见到胸腔内跳动的心脏与肺之间的红白交界处；

(5)开胸：用眼科镊提起第4肋骨，沿着肋骨上缘剪开肋间肌，开口约0.5cm，显露心脏，撕开心包膜，暴露左心耳及左心室的交界处；

(6)结扎冠状动脉：用左手中指抬起右胸廓，示指和拇指将心脏推挤到切口处，此时右胸廓夹在操作者的中指和示指之间，示指在右胸壁上，拇指在左胸壁，切口在示指和拇指之间；此时由于开胸大幅度跳动的心脏被固定在胸壁切口处，用6-0的带针缝合线结扎冠状动脉左前降支，深度约0.6mm；

(7)关胸：剪断结扎冠脉的缝合线，迅速顺势挤出胸腔内的气体，拉紧荷包缝合，打结关胸，碘伏消毒，撤离面罩，停止麻醉；

(8)苏醒：将固定小鼠的胶布撕下，使小鼠处于俯卧位或者右侧卧位于温暖的笼子里；

(9)饲养与观察：将苏醒的小鼠饲养于恒温25摄氏度的动物房14天，给予充足的食物和水，以及清洁的垫料。

4.根据权利要求1所述的快速建立小鼠心肌梗死模型的改进方法，其特征在于：用EDTA管收集眼球血，将血液样本在离心机中，转速4000r，时间10min离心，并将上层血清置于-80摄氏度的冰箱中保存。

5.根据权利要求4所述的快速建立小鼠心肌梗死模型的改进方法，其特征在于：使用Elisa检测试剂盒，按照试剂盒上的说明书进行操作检测TNF-α、TGF-β和IL-10。

6.根据权利要求2所述的快速建立小鼠心肌梗死模型的改进方法，其特征在于：使用心电图机，记录术前、术后1d肢体导联和胸导导联，以及M型超声心动图测量左心功能及室壁运动情况。