[发明专利]一种耐热型中性普鲁兰酶的突变体及其应用有效
申请号: | 202110527128.3 | 申请日: | 2021-05-14 |
公开(公告)号: | CN113265386B | 公开(公告)日: | 2022-11-29 |
发明(设计)人: | 聂尧;穆晓清;毕家华 | 申请(专利权)人: | 宿迁市江南大学产业技术研究院 |
主分类号: | C12N9/44 | 分类号: | C12N9/44;C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/19;C12P19/16;C12P19/04;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 仇钰莹 |
地址: | 223800 江苏省宿迁市宿迁经*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 耐热 中性 普鲁兰酶 突变体 及其 应用 | ||
1.一种耐热型中性普鲁兰酶的突变体,其特征在于,所述突变体是以氨基酸序列如SEQID NO .1所示的普鲁兰酶为出发序列,进行以下(a)~(d)中的任意一种改进:
(a)将SEQ ID NO .1所示氨基酸序列中的第73位苏氨酸突变为溴乙基酪氨酸,以及第171位异亮氨酸突变为半胱氨酸;
(b)将SEQ ID NO .1所示氨基酸序列中的第135位脯氨酸突变为溴乙基酪氨酸,以及第314位丙氨酸突变为半胱氨酸;
(c)将SEQ ID NO .1所示氨基酸序列中的第73位苏氨酸突变为溴乙基酪氨酸,以及第171位异亮氨酸突变为半胱氨酸;以及第126位的苏氨酸突变为苯丙氨酸;
(d)将SEQ ID NO .1所示氨基酸序列中的第73位苏氨酸突变为溴乙基酪氨酸,以及第171位异亮氨酸突变为半胱氨酸;以及第126位的苏氨酸突变为苯丙氨酸;以及第72位丙氨酸突变为精氨酸。
2.根据权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述突变体的氨基酸序列的N端融合信号肽PelB。
3.编码权利要求1-2任意一项所述突变体的基因。
4.一种重组载体,其特征在于,所述重组载体携带权利要求3所述的基因。
5.根据权利要求4所述的重组载体,其特征在于,所述重组载体的出发载体为pET系列、Duet系列、pGEX系列、pHY300、pHY300PLK、pPIC3K或pPIC9K系列中的任意一种。
6.一种重组微生物细胞,其特征在于,携带权利要求3所述的基因或者表达权利要求1-2任一所述的突变体。
7.根据权利要求6所述的重组微生物细胞,其特征在于,所述微生物细胞为原核生物或者真核生物。
8.权利要求1-2任意一项所述的突变体、权利要求3所述的基因、权利要求4或5所述的重组载体在水解淀粉中的应用。
9.一种提高分解淀粉效率的方法,其特征在于,所述方法是利用权利要求1-2任意一项所述的突变体加入到糊化后淀粉水溶液中,在60℃-65℃条件下水解。
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