[发明专利]一种用于扩增脐带血造血干细胞的培养基

权利要求书

1.一种用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，包括基础培养基和添加在基础培养基中以下组分：雷公藤内酯醇、P27抑制剂、改性纳米二氧化钛、干细胞因子、2-巯基乙醇、L-肉毒碱、尼克酰胺、亚油酸、IL-2；

所述改性纳米二氧化钛的制备过程如下：

（1）将棉花裁切后浸泡在75%乙醇中进行预处理，取出后经去离子水冲洗后烘干；

（2）将烘干后的棉花送入碳化炉，在绝氧条件下进行碳化处理，得到碳纤维；

（3）将钛酸丁酯溶于无水乙醇中加入抑制剂，再加入分散剂和去离子水，调节溶液pH至2.5-4.5，搅拌后得到二氧化钛溶胶；

（4）将步骤（2）的碳纤维加入步骤（3）的二氧化钛溶胶中，充分吸附后取出碳纤维，用40%乙醇清洗后放入盛有去离子水的高压反应釜中，将高压反应釜置于烘箱中热处理后取出碳纤维，烘干得到负载在碳纤维上的改性纳米二氧化钛。

2. 根据权利要求1所述用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，以终浓度计，各组分的质量浓度为：雷公藤内酯15-25ng/mL、P27抑制剂3-5ng/mL、改性纳米二氧化钛5-10 ng/mL、干细胞因子20-30 ng/mL、2-巯基乙醇1-5ng/mL、L-肉毒碱12-18 ng/mL、尼克酰胺1-5μg/mL、亚油酸20-30 ng/mL、IL-2 5-10 ng/mL。

3. 根据权利要求2所述用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，以终浓度计，各组分的质量浓度为：雷公藤内酯20ng/mL、P27抑制剂4ng/mL、改性纳米二氧化钛8ng/mL、干细胞因子25 ng/mL、2-巯基乙醇2ng/mL、L-肉毒碱15 ng/mL、尼克酰胺3μg/mL、亚油酸25 ng/mL、IL-2 8ng/mL。

4.根据权利要求1所述用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，所述基础培养基为IMEM培养基。

5.根据权利要求1所述用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，步骤（2）中碳化处理的过程为：升温至1000-1200℃，碳化处理90-100min。

6.根据权利要求1所述用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，步骤（3）中所述抑制剂为柠檬酸，所述分散剂为乙二醇乙醚。

7.根据权利要求6所述用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，步骤（3）中钛酸丁酯和无水乙醇的质量比为1:5-10，钛酸丁酯和抑制剂的质量比为1:0.5-1，钛酸丁酯和分散剂的质量比为1:1-2，钛酸丁酯和去离子水的质量比为1:2-4。

8.根据权利要求1所述用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，步骤（4）中碳纤维和二氧化钛溶胶的质量比为：1:5-15。

9.根据权利要求1所述用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，步骤（4）的热处理过程为：在200-220℃热处理4-5h。

10.根据权利要求1所述用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，步骤（4）中烘干温度为100-120℃。