[发明专利]一种对依托泊苷与卡铂联合耐药的人小细胞肺癌细胞株及其建立方法和应用

说明书

本发明提供了一种对依托泊苷与卡铂联合耐药的人小细胞肺癌细胞株及其制备方法和应用。所述人小细胞肺癌细胞株保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：C202168。本发明的小细胞肺癌细胞株性状稳定，可稳定多次传代，可用于在哺乳动物中产生人小细胞肺癌，制备人小细胞肺癌模型，并且该细胞对小细胞肺癌一线治疗药物依托泊苷与卡铂联合用药耐受，可用于小细胞肺癌耐药分子机制研究，和筛选治疗耐药型人小细胞肺癌的候选药物，为小细胞肺癌研究提供新的更接近于临床肿瘤生物学特性的实验材料。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种具有依托泊苷与卡铂联合耐药性的人小细胞肺癌细胞株及其建立方法和应用。

背景技术

小细胞肺癌是肺癌的一种特殊病理类型，属于恶性度极高的神经内分泌肿瘤，占肺癌发病率的10％～15％。其特点是恶性程度高,生长迅速，倍增时间短，侵袭性强，极易发生转移，约60％的患者就诊时已发生远处转移，其中约30％左右的患者会发生骨转移，区域淋巴结和远处转移早期即可出现，中位总生存期只有8个月-13个月，而且预后差，五年生存率小于7％，大多数患者于诊断后1年内死亡。

在小细胞肺癌治疗当中，依托泊苷联合铂类制剂的化疗方案是目前小细胞肺癌化疗的一线治疗方案。依托泊苷能够通过与DNA拓扑异构酶II形成可逆性药-酶-DNA复合物，从而起到修复受损DNA，降低细胞毒作用，延长给药时间，提高药物抗肿瘤时间的作用，在小细胞肺癌的治疗中具有重要意义。卡铂为第二代铂类抗肿瘤药物，与顺铂相比其肝肾毒性和神经毒性明显降低。初次患者对化疗敏感，一线化疗缓解率高，中位生存期为9.4～12.8个月，2年总存活率为5.2％～19.5％，但大部分小细胞肺癌患者在化疗停止后3个月左右出现复发转移，其高耐药率和复发率仍是小细胞肺癌化疗中存在的最大问题，这使得许多接受依托泊苷联合铂类治疗的患者在遭受了化疗毒副作用的同时，却没有得到较好的治疗效果。但到目前为止卡铂耐药的确切分子机制还不明确。因此，建立对依托泊苷与卡铂联合耐药的人小细胞肺癌细胞株对于研究小细胞肺癌耐药和筛选治疗耐药型人小细胞肺癌的候选药物具有必不可少的重要作用。

发明内容

本发明要解决的技术问题就是为小细胞肺癌耐药分子机制研究，和筛选治疗耐药型人小细胞肺癌的候选药物，提供一种具有对依托泊苷与卡铂联合耐药性的人小细胞肺癌细胞株及其建立方法和应用。

一种对依托泊苷与卡铂联合耐药的人小细胞肺癌细胞，保藏编号为CCTCC No：C202168。

本发明还提供如上所述的人小细胞肺癌细胞的子代细胞。

所述的对依托泊苷与卡铂联合耐药的人小细胞肺癌细胞的应用，用于小细胞肺癌依托泊苷与卡铂联合耐药机制研究提供实验材料。

所述的对依托泊苷与卡铂联合耐药的人小细胞肺癌细胞的应用，所述的实验材料包括：小细胞肺癌依托泊苷与卡铂联合耐药细胞株和/或小细胞肺癌依托泊苷与卡铂联合耐药动物模型。

所述的对依托泊苷与卡铂联合耐药的人小细胞肺癌细胞的应用，所述的动物模型是裸鼠。

所述的对依托泊苷与卡铂联合耐药的人小细胞肺癌细胞的应用，用于构建体内或体外药物筛选平台，筛选治疗依托泊苷与卡铂联合耐药型人小细胞肺癌药物。

所述的对依托泊苷与卡铂联合耐药的人小细胞肺癌细胞的应用，包括以下步骤：

(1)将所述的对依托泊苷与卡铂联合耐药的小细胞肺癌细胞的子代细胞制备成细胞悬液，接种于哺乳动物皮下，进行饲养，获得耐药型人小细胞肺癌动物模型；

(2)将测试药物施用于耐药型动物模型，施用后导致小细胞肺癌症状改善或治愈的测试药物即为治疗小细胞肺癌的候选药物。

在步骤中，将测试药物通过尾静脉注射、口服、腹腔注射或于肿瘤局部用药等方式施用于小细胞肺癌荷瘤动物。较佳的使用对照实验，一种优选方式是：同时还使用不含测试药物的溶剂施用于小细胞肺癌荷瘤动物作为对照。