[发明专利]一种特异性杀灭猪链球菌的基因工程裂解酶及医用用途

说明书

本发明公开了一种特异性杀灭猪链球菌的基因工程裂解酶（Ply1228）及其制备方法，提供了一个新的猪链球菌噬菌体裂解酶，可以单独或与其他物质复配使用，具有强裂解活性和较宽的裂解谱，能够有效杀灭多种血清型的猪链球菌，为预防和治疗猪链球菌感染引起的疾病提供一种新的药物。

技术领域

本发明公开了一种特异性杀灭猪链球菌的基因工程裂解酶（Ply1228）及其制备方法，本发明还进一步提供了该基因工程裂解酶（Ply1228）的医用用途，对猪链球菌表现出广谱高效的抗菌活性，属于生物工程技术领域。

背景技术

猪链球菌是一种重要的人畜共患病原体。根据细菌表面荚膜多糖（CPS）的抗原性，可将猪链球菌划分为33个血清型。其中2型、9 型、3型、1/2型和7型为猪链球菌最主要的血清型，并且2型猪链球菌在世界范围内分布最广泛和危害最严重。猪链球菌感染可能引起败血症、脑膜炎、心内膜炎、肺炎和关节炎等疾病，致死率非常高。由于抗生素的滥用使得猪链球菌的耐药形势愈发严峻，耐药及多重耐药菌株的不断涌现使抗生素的预防和控制变得更加困难。在当下“减抗”、“限抗”和“禁抗”的背景下，迫切需要寻找一种针对猪链球菌不易产生耐药性的新型抗菌制剂。

噬菌体裂解酶是噬菌体基因组编码的作用于细菌细胞壁肽聚糖的一类水解酶。噬菌体裂解酶对革兰氏阳性菌作用广泛。与噬菌体和抗生素相比，噬菌体裂解酶具有如下优势：1、裂解酶直接作用于细菌细胞壁肽聚糖，而肽聚糖是细菌赖以生存的重要结构，肽聚糖的改变可能对细菌产生致命的影响，这也极大地降低了细菌对裂解酶产生抗性的可能；2、裂解酶是蛋白，可以通过体外载体构建、表达和纯化得到，可以大量制备且成本较低；3、裂解酶作为抗菌制剂进入生物体内不存在生物安全性问题。4、裂解酶易于人工设计和改造。革兰氏阳性菌裂解酶结构通常是模块化的，既具有水解催化域(Catalytic domain, CD)，也具有细胞壁结合结构域(Catalytic domain, BCD)。我们可以通过将不同来源的CD和CBD组合，构建比亲代裂解酶性能更优良的嵌合裂解酶。这些优势使得裂解酶具有应用于临床耐药及多重耐药猪链球菌感染治疗的巨大潜力。

发明内容

本发明公开一种特异性杀灭猪链球菌的基因工程裂解酶（Ply1228），该裂解酶对猪链球菌具有强杀菌活性和宽宿主谱，对猪链球菌8种血清型（2、3、7、9、10、12、14和27型）均显示出强裂解活性。此外，Ply1228在体外表现出较强的酸碱和高温耐受能力。该裂解酶为预防和治疗由猪链球菌感染引起的疾病感染提供一个很有潜力的新药物，具有很好的临床应用价值。

本发明公开的一种特异性杀灭猪链球菌的基因工程裂解酶Ply1228，其氨基酸序列见核苷酸序列见序列表。QSE NO:1

本发明提供了来源于猪链球菌基因工程裂解酶Ply1228基因的表达载体及其重组菌株。

本发明提供了基因工程裂解酶Ply1228的表达与纯化方法及一般生物学特性

本发明所述的一种来源于猪链球菌基因工程裂解酶Ply1228在特异性裂解猪链球菌的用途。

本发明所述的一种来源于猪链球菌基因工程裂解酶Ply1228用于制备预防和控制猪链球菌感染药物中的用途。

本发明所述的一种来源于猪链球菌裂解酶Ply1228在杀灭空间环境、动物和人体中猪链球菌的应用。

本发明公开了一种用于杀灭猪链球菌的药物组合物，其包含权利要求书中所述的裂解酶Ply1228作为主要活性成分。

本发明所述的组合物包括液体制剂、冻干制剂或口服固体制剂等医药学上的任何剂型。

本发明的积极效果在于：

提供了一个新的猪链球菌噬菌体裂解酶，可以单独或与其他物质复配使用，具有强裂解活性和较宽的裂解谱，能够有效杀灭多种血清型的猪链球菌，为预防和治疗猪链球菌感染引起的疾病提供一种新的药物。

附图说明