[发明专利]黄曲霉毒素多孔芳香族骨架PAF-6分子印迹材料及其应用

说明书

本发明属食品检测材料技术领域，涉及黄曲霉毒素多孔芳香族骨架PAF‑6分子印迹材料及其应用。采用多孔芳香族骨架PAF‑6作为支撑载体，使用悬挂聚合法，使功能单体丙烯酰胺分布在PAF‑6的内部和表面。华法林钠用作替代模板，在聚合的过程中华法林钠不仅可以通过氢键作用与丙烯酰胺结合在一起，而且通过芳环与PAF‑6形成相互作用，加强与聚合材料的相互作用力。然后在交联剂EDMA和引发剂AIBN的作用下，成功制备了PAF‑6@SMIPs。以其为填充材料制备成PAF‑6@SMIPs的SPE柱，对四种黄曲霉毒素能同时分离和富集，选择性好、灵敏度高，为替代商业IAC柱提供了可能。

技术领域

本发明属食品检测材料技术领域，涉及黄曲霉毒素分子印迹材料，尤其涉及黄曲霉毒素多孔芳香族骨架PAF-6分子印迹材料及其应用。

背景技术

粮食在生长，收割，晾晒，储存的过程中，在合适的温度，湿度和底物水分活度的影响下，极其容易被真菌污染，这些真菌会产生结构不同的次级代谢产物---真菌毒素。真菌毒素的高稳定性，富集性，特异性和相加协同性的特点，使得真菌毒素极难被身体代谢，真菌毒素对人类和牲畜的健康具有严重威胁。

真菌毒素的种类很多，其中较为常见的真菌毒素有：玉米赤霉烯酮(Zearalenone，ZEN)，黄曲霉毒素(Aflatoxins,AFs)，赭曲霉毒素A(Ochratoxin A，OTA)等。不同的毒素具有不同的毒性，黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉产生的最常见和具有剧毒的毒素。其生产受生态和环境因素(包括：高温，高湿度和底物水分活度)的影响。当黄曲霉毒素通过食物链被摄入或吸入生物体内时，它将增加生物体的致癌、致畸和致突变活性。AFs有20多种类型，其中最突出的有4种类型(Aflatoxin B1，B2，G1，G2)。几种真菌毒素的结构式如下所示：

因此，各国对黄曲霉毒素的含量检测都非常重视。如何对这些真菌毒素进行大规模的常规检测具有重要的意义。

目前针对谷物中ZEN，AFs(AFB1，AFB2，AFG1，AFG2)和OTA的检测定量方法主要有液相色谱法(荧光检测器)，液相色谱-质谱联用法，毛细管电泳法，酶联免疫吸附法，表面增强拉曼散射法等。在检测之前，必须对样品进行前处理，以免复杂的基质对仪器造成污染，影响仪器检测的灵敏度和精确度。因此，针对谷物，选择合适的样品前处理手段用于分离和富集复杂基质中的ZEN，AFs和OTA非常重要。

分子印迹技术(Molecularly imprinted technology，MIT)作为选择性萃取、富集和分离的识别工具近年来已得到关注和应用。由此科研工作者合成了大量的分子印迹聚合物(Molecular imprinted polymers，MIPs)，已经有众多研究将MIPs与SPE相结合，将MIPs作为SPE柱中的分离介质，实现对各种复杂基质的分离与富集。由于谷物中的真菌毒素成分更为复杂，更难以分离，用于谷物中的真菌毒素分离与富集的分子印迹聚合物报道不常见。因此，探索合成新型分离介质作为SPE中柱填料，用于谷物中的真菌毒素的高效分离与富集是目前迫切需要解决的问题。

发明内容

本发明目的在于提供一种黄曲霉毒素多孔芳香族骨架PAF-6分子印迹材料，实现对黄曲霉毒素的高选择性富集，便于对谷物中黄曲霉毒素进行准确定量、定性检测。

针对表面分子印迹聚合物(Surface molecular imprinted polymers，SMIPs)一个重要问题是采用何种材料作为聚合物层包裹的核。为实现本发明目的，本发明筛选各种新型材料，最终筛选多孔芳香族骨架(Porous aromatic framework，PAF)做为载体，以华法林钠作为AFs的替代模板，在其表面合成印迹聚合物层，使得印迹位点分布在材料表面，制得黄曲霉毒素多孔芳香族骨架PAF-6分子印迹材料。