[发明专利]一种3D打印亚麻籽水凝胶支架及制备方法和应用

权利要求书

1.一种3D打印甲基丙烯酸酯化亚麻籽胶水凝胶支架的制备方法，其特征在于，甲基丙烯酸酯化亚麻籽胶水凝胶支架的主体由甲基丙烯酸酯化亚麻籽胶纤维网络构成，且纤维网络中负载有活性生物细胞，所述支架的制备包括以下步骤：

步骤1：亚麻籽胶原料溶于超纯水中，在60℃充分搅拌溶解得到亚麻籽胶水溶液；

步骤2：在50℃下按100μL /min的速度缓慢加入改性剂甲基丙烯酸酐，持续50℃搅拌1小时；

所述改性剂与亚麻籽胶原料配比范围为1mL/g-2.5mL/g；

步骤3：滴加氢氧化钠使反应体系的pH维持在7.0，持续反应5小时；

步骤4：根据加入改性剂的量不同得到不同接枝度的甲基丙烯酸酯化亚麻籽胶衍生物，所得产物用3500-4000D滤膜透析、冻干，获得多孔的海绵状改性亚麻籽胶干粉；

步骤5：用含浓度为0.1％w/v的光引发剂的PBS或中性培养液完全溶解所述改性亚麻籽胶干粉，制备成甲基丙烯酸酐改性亚麻籽水凝胶；

步骤6：将步骤5所得甲基丙烯酸酐改性亚麻籽水凝胶与细胞室温下充分混匀，通过3D-Bioplotter system进行挤压式打印，通过喷出的纤维丝逐层堆积，形成甲基丙烯酸酯化亚麻籽胶支架；

步骤7：打印后的支架进行紫外光交联，得到负载活性细胞的3D打印支架。

2.根据权利要求1所述的一种3D打印甲基丙烯酸酯化亚麻籽胶水凝胶支架的制备方法，其特征在于，步骤1中，所述亚麻籽胶原料的水溶液浓度为1%w/v-2%w/v。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的一种3D打印甲基丙烯酸酯化亚麻籽胶水凝胶支架的制备方法，其特征在于，步骤6中，所述甲基丙烯酸酯化亚麻籽胶水凝胶打印的浓度范围为3.5%-6%。

4.根据权利要求1-2中任一项所述的一种3D打印甲基丙烯酸酯化亚麻籽胶水凝胶支架的制备方法，其特征在于，步骤7中，所述亚麻籽胶水凝胶支架进行紫外光交联的时长为60s-150s。

5.根据权利要求4所述的一种3D打印甲基丙烯酸酯化亚麻籽胶水凝胶支架的制备方法，其特征在于，步骤7中，所负载活性细胞种类为骨髓间充质干细胞、脐带干细胞、脂肪干细胞或软骨细胞中的一种或多种。

6.根据权利要求5所述的一种3D打印甲基丙烯酸酯化亚麻籽胶水凝胶支架的制备方法，其特征在于，所述负载活性细胞浓度范围为1×10⁷cell/mL-4×10⁷cell/mL。

7.一种3D打印甲基丙烯酸酯化亚麻籽胶水凝胶支架，其特征为，采用权利要求1-6任一项所述的方法所制备而成。