[发明专利]一种香橼果实多糖及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种香橼果实多糖的应用，其特征在于：所述香橼果实多糖在制备降血糖药物和/或抗皮肤光老化药物中的应用；

所述香橼果实多糖为两种香橼果实精制多糖中一种以上；所述香橼果实精制多糖分别为香橼果实精制多糖CM-1和CM-2，

香橼果实精制多糖CM-1为一种阿拉伯木聚糖，以1，4-β-D-Xylp为主链，在O-3位被α-L-Araf单取代；CM-1主要由阿拉伯糖，木糖，甘露糖和葡萄糖组成，摩尔比为（10.5~11）：（11.2~12）：1：（1.5~2）；

所述香橼果实精制多糖CM-1分子量相对均一，重均平均分子量Mw为21520 Da，多分散性指数PDI为1.227493；

CM-2为一种半乳阿拉伯聚糖，以(1→5)-α-L-Araf为主链，在O-2或/和O-3位置主要被β-D-Galp取代，CM-2主要由阿拉伯糖，甘露糖，葡萄糖和半乳糖组成，摩尔比为（25~26）：（1~2）：1：（6~7）；

所述香橼果实精制多糖CM-2分子量相对均一，重均平均分子量Mw为22303 Da，多分散性指数PDI为1.219320；

所述香橼果实多糖的制备方法，包含如下步骤：

1）制备香橼果实水提取物，脱色，脱蛋白，醇沉，将沉淀物干燥，得到香橼果实粗多糖；

2）将香橼果实粗多糖经过阴离子交换柱的分离纯化，洗脱剂依次为水和氯化钠溶液，获得两种洗脱组分；分别将两种洗脱组分经过凝胶柱的分离纯化，洗脱剂为水，获得两种精制多糖，分别记为香橼果实精制多糖CM-1和CM-2；

步骤2）中将香橼果实粗多糖经过阴离子交换柱的分离纯化时，依次采用水和氯化钠溶液进行洗脱；氯化钠溶液的浓度为0.01~0.1mol/L；

步骤2）中将香橼果实粗多糖经过阴离子交换柱的分离纯化时；洗脱剂洗脱时，流速为1～2mL/min；

步骤2）中所述阴离子交换柱为阴离子交换柱DEAE Sepharose Fast Flow；所述凝胶柱为丙烯葡聚糖凝胶Sephacryl S-100HR和/或交联葡聚糖凝胶Sephadex G-100；

所述经过凝胶柱的分离纯化，洗脱时流速为0.3～0.6mL/min。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：步骤2）的具体步骤：

P1：阴离子交换柱中装柱：将经预处理的DEAE Sepharose Fast Flow脱气；装入层析柱；平衡进出口流速；

P2：阴离子交换柱中上样：将香橼果实粗多糖采用水溶解，滤膜过滤，上样，静置；

P3：阴离子交换柱中洗脱：依次用水，NaCl溶液洗脱，流速为1～2mL/min，每管收集2～5mL，每种洗脱剂收集50～100管；苯酚硫酸法跟踪检测，使用紫外分光光度计于490nm处测定吸光值；分别以管数、OD 490nm作为横、纵坐标，绘制洗脱曲线；分别合并不同洗脱剂对应的洗脱液；减压浓缩；透析，干燥，获得两种洗脱组分记为CM-fr.1和CM-fr.2；

P4：凝胶柱中装柱：将凝胶脱气装入层析柱；平衡进出口流速；

P5：凝胶柱中上样：将阴离子交换柱中所得到的两种洗脱组分分别采用水溶解，滤膜过滤，上样，静置；

P6：凝胶柱中洗脱：用水洗脱，流速为0.3～0.6mL/min，每管收集1～2mL，每种洗脱剂收集40～60管；苯酚硫酸法跟踪检测，使用紫外分光光度计于490nm处测定吸光值；分别以管数、OD 490nm作为横、纵坐标，绘制洗脱曲线；分别合并CM-fr.1和CM-fr.2经过洗脱的洗脱液；减压浓缩；干燥，获得两种精制多糖。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：

步骤1）中所述香橼果实粗多糖的具体制备步骤为

S1、将香橼果实粗粉采用有机溶剂进行脱脂，获得脱脂的香橼果实粉；

S2、将脱脂的香橼果实粉进行热水浸提，获得香橼果实水提取物；脱色，脱蛋白，醇沉，将沉淀物干燥，获得香橼果实粗多糖。