[发明专利]一种具有稳定促生作用的内生真菌AT177及其应用

说明书

本发明公开了一种具有稳定促生作用的内生真菌AT177(Leptosphaerulina chartarum AT177)及其应用。属于微生物技术领域。本发明以促进烟草生长、提高烟叶品质为目标，对分离获得的烟草内生真菌进行了筛选，获得具有明显促生效果的功能菌株，可应用于制备烟草专用微生物菌肥。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，更具体的说是涉及一种具有稳定促生作用的内生真菌AT177及其应用。

背景技术

烟草(学名：Nicotiana tabacum L.)是茄科烟草属植物，一年生或有限多年生草本，全体被腺毛；根粗壮。茎高0.7～2米，基部稍木质化。叶矩圆状披针形、披针形、矩圆形或卵形，顶端渐尖，基部渐狭至茎成耳状而半抱茎。花序顶生，圆锥状，多花；花梗长5～20毫米。蒴果卵状或矩圆状，长约等于宿存萼。种子圆形或宽矩圆形，径约0.5毫米，褐色。夏秋季开花结果。原产于南美洲。中国南北各省区广为栽培。

内生真菌是生长在健康植物组织内的一类微生物种群，在植物生长发育及在植物抗生物和非生物胁迫中发挥着重要作用。研究表明内生真菌能促进植物生长、诱导植物产生抗病性、提高植物对重金属的耐性等。烟草是重要的叶用经济作物，在国民经济中占据重要的地位。烟草产量和品质的提高，是烟草产业健康发展的基础。通过发掘利用烟草内生真菌资源，对促进烟草生长、提高烟草抗病虫害、抗重金属和抗干旱胁迫具有积极意义。

因此，从烟草内生真菌中筛选获得具有显著促生效果的菌株，如何通过烟草-内生真菌共培养体系实现稳定促生效果，使烟苗的个体间差异较小是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种具有稳定促生作用的内生真菌AT177及其应用。

其中，内生真菌(Leptosphaerulina chartarum AT177)AT177保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。保藏编号：CGMCCNo.21951；保藏日期2021年4月12日。

本发明以促进烟草生长、提高烟叶品质为目标，对分离获得的烟草内生真菌进行了筛选，获得具有明显促生效果的功能菌株，可应用于制备烟草专用微生物菌肥

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种烟草促生的菌肥，包括内生真菌AT177(Leptosphaerulina chartarumAT177)，保藏编号为CGMCC No.21951。

本发明还提供了一种烟草促生的方法，使用内生真菌AT177作为菌肥施用，保藏编号为CGMCC No.21951。

本发明还提供了一种内生真菌AT177在促进烟草生产中的应用，使用包括内生真菌AT177的菌肥，保藏编号为CGMCC No.21951。

优选的：包括以下步骤：

1)育苗：取烟草种子置于无菌水浸泡后揉搓；育苗土于育苗盘中吸满水备用，将揉搓后的种子，均匀的洒在育苗盘中，温室中培养，长至4片叶时用于移栽；

2)菌肥的制备：大麦粒在水中浸泡过夜后，密封高温湿热灭菌，冷却备用，得麦粒固体培养基；菌株活化后，接种于麦粒固体培养基中，恒温黑暗培养，待菌丝布满麦粒；

3)菌肥的施用：采用“土壤层+菌肥层+土壤层”的方法施用菌肥，水分吸透后，育苗至5片叶时，移栽至花盆中，温室中培养。

优选的：步骤1)和步骤3)温室的环境：25℃16h光照，光照强度80μmm^-2sec^-1，再置于22℃8h黑暗培养，交替循环；培养时间45～60d。

优选的：步骤2)高温湿热灭菌：121℃灭菌20min，灭菌三次。