[发明专利]一种黄连生物碱的原位生成离子对辅助的液-液微提取方法

说明书

本发明涉及天然药材中生物碱的提取领域，为解决现有现有技术下的萃取方法都存在流程繁琐，耗时长的缺陷的问题，公开了一种黄连生物碱的原位生成离子对辅助的液‑液微提取方法，包括以下步骤：（a）称取一定量的黄连粉末加入提取溶剂进行超声提取，过滤后得到样品提取液；（b）取一定量的样品提取液调节pH至弱酸性；（c）向样品提取液中加入染料溶液与成键试剂，涡旋后静置；（d）取下层成键试剂离心，取离心后的下层溶液干燥后即得黄连生物碱。本发明在酸性环境下，使微量生物碱和有机染料在线原位形成离子对，用成键试剂浓缩和提取离子对配合物，对生物碱富集效果好，萃取效率高，操作简单，有机试剂用量少，环境友好。

技术领域

本发明涉及天然药材中生物碱的提取领域，尤其涉及一种黄连生物碱的原位生成离子对辅助的液-液微提取方法。

背景技术

黄连是中国黄连(Coptis chinensis Franch)的干燥根茎，因其清热解毒的功能在世界各地得到了广泛的应用。生物碱是黄连的药理活性成分，包括表小檗碱、黄连素、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀等，现代医学药学研究已证实黄连中的生物碱对糖尿病及其并发症均有积极作用。目前主要的黄连中生物碱的提取方法有微波辅助提取、索氏提取、加热回流提取及超声辅助提取。由于这些方法存在操作复杂、效率低、消耗有机溶剂多等问题，需要开发一种比以往方法更简单、更快速、更经济的微萃取方法。

例如，一种在中国专利文献上公开的“黄连生物碱的萃取方法”，其公告号为CN108354983B，包括以下步骤：将黄连研磨成粉，加入盐酸溶液中，进行粗提取，过滤并收集滤液，将滤液冷冻干燥后得到黄连粗提物；将乙腈和水以2～12:3的体积比混合制成乙腈水溶液，再加入制备的黄连粗提物，涡旋振荡，得到混合液；在制备的混合液中加入硫酸铵，涡旋振荡混匀后，离心静置后分层，取上相干燥后，得到所述黄连生物碱。该方法中，黄连粗提物需要冷冻干燥得到，操作较为复杂，并且提取时需要较高浓度的母液。

发明内容

本发明为了克服现有技术下的萃取方法都存在流程繁琐，耗时长的缺陷的问题，提供一种不直接添加离子对试剂提取天然生物碱，而是使用酸性染料去质子化产生的阴离子与生物碱质子化产生的阳离子在线形成离子对辅助富集生物碱的黄连生物碱的原位生成离子对辅助的液-液微提取方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种黄连生物碱的原位生成离子对辅助的液-液微提取方法，所述液-液微提取方法包括以下步骤：

(a)称取一定量的黄连粉末加入提取溶剂进行超声提取，过滤后得到样品提取液；

(b)取一定量的样品提取液调节pH至弱酸性；

(c)向样品提取液中加入染料溶液与成键试剂，涡旋对样品进行富集后静置；

(d)取下层成键试剂离心，取离心后的下层溶液干燥后即得黄连生物碱。

液-液微提取是液-液提取的微缩过程，又称溶剂提取与分配，是根据目标化合物在两种不混溶液体中的相对溶解度来分离目标化合物的方法，本发明中，利用染料与生物碱原位生成离子对辅助液-液微提取，染料可与待提取的生物碱可以形成一个带正电荷和一个带负电荷的双重带电粒子对，该离子对很容易用键合剂提取，因此生物碱与染料反应后用成键试剂进行萃取；本方法应用范围广泛，可用于多种药材中生物碱的检测，在天然药材中提取生物碱的微量分析中具有广泛的应用潜力。

作为优选，所述步骤a中黄连粉末质量与提取溶剂体积的比例为(0.25-1.25)g:10mL，提取溶剂为甲醇、乙醇或丁醇，超声提取时间为20-40min。

用提取溶剂将黄连中的生物碱粗提取出来，其中甲醇对黄连样品中生物碱的溶解能力最佳。

作为优选，其特征是，所述步骤a中黄连粉末的粒径大于等于80目。

黄连样品粉粹成较细的粉末，提取效果更好。