[发明专利]一种基于肿瘤细胞膜的生物活性制剂及其制备方法与应用

说明书

本发明提供一种基于肿瘤细胞膜的生物活性制剂及其制备方法与应用，属于医药技术领域。本发明通过提取荷瘤小鼠的肿瘤组织，并处理加工形成肿瘤细胞膜囊泡，经化学修饰后形成可在肿瘤组织中原位形成凝胶的凝胶因子，在共载细胞周期蛋白依赖性激酶5(CDK5)抑制剂和外泌体抑制剂后，可以有效的调控肿瘤细胞和肿瘤外泌体PD‑L1，从而同时解除局部和系统性免疫抑制，因此具有良好的实际应用之价值。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种基于肿瘤细胞膜的生物活性制剂及其制备方法与应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

通常认为程序性死亡1配体(PD-L1)在肿瘤细胞表面上起作用，然而基于PD-L1阻断的免疫疗法临床病例中失败率仍然很高。当前增强基于PD-L1的疗法的反应效率的方法仅限于局部调节肿瘤部位，例如增加肿瘤的免疫原性和重塑肿瘤的免疫微环境，而忽视了系统性的免疫抑制因素。值得注意的是，PD-L1还在肿瘤细胞衍生的外泌体表面表达，它随外泌体循环至全身，从而结合并耗竭循环中的T细胞，产生全身性免疫抑制全身，因此，对于免疫检查点治疗，循环外泌体PD-L1的调节与肿瘤细胞PD-L1的调节一样重要。

但是目前的PD-L1阻断抗体对外泌体PD-L1无效，原因之一是外泌体上PD-L1的独特表达方式使其对抗体的反应性降低。另一个原因是，外泌体可以循环至一些能屏蔽抗体作用的部位。迄今为止，在临床实践中还没有一种可以直接靶向外泌体PD-L1的药物，因此对精确调控外泌体PD-L1提出了挑战。而直接抑制肿瘤细胞外泌体的产生为降低总外泌体PD-L1提供了另一种策略。但是，考虑到正常细胞分泌的外泌体对维持正常生理至关重要，如何选择性地抑制肿瘤特异性外泌体从而降低潜在的全身毒性是另外一个亟待解决的难题。

发明内容

为了克服上述技术问题，本发明提供一种基于肿瘤细胞膜的生物活性制剂及其制备方法与应用。本发明通过提取荷瘤小鼠的肿瘤组织，并处理加工形成肿瘤细胞膜囊泡，经化学修饰后形成可在肿瘤组织中原位形成凝胶的凝胶因子，在共载CDK5抑制剂和外泌体抑制剂后，可以有效的调控肿瘤细胞和肿瘤外泌体PD-L1，从而同时解除局部和系统性免疫抑制，因此具有良好的实际应用之价值。

为实现上述技术目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明的第一个方面，提供CDK5抑制剂联合外泌体抑制药物在制备抗肿瘤药物中的应用。

所述CDK5抑制剂可以选自siRNA、shRNA、抗体、小分子化合物和肽段；

优选地，所述CDK5抑制剂选自：Roscovitine(Rosco)，奥罗莫星(olomoucine)及其衍生物，Dinaciclib(MK-7965，SCH727965)，AT7519，CIP，p5和Cpd1等；

更优选地，所述CDK5抑制剂为Roscovitine；

所述外泌体抑制药物包括但不限于钙离子离子通道抑制剂类、质子泵抑制剂类、鞘磷脂-核糖核酸酶抑制剂类、内皮素受体A干扰类药物；

优选地，所述外泌体抑制药物可以选自：二甲基阿米洛利(DMA)、奥美拉唑、磺胺异恶唑、鞘磷脂酶抑制剂GW4869等；

更优选地，所述外泌体抑制药物为二甲基阿米洛利；

进一步地，所述CDK5抑制剂为Roscovitine，外泌体抑制药物为二甲基阿米洛利，二者质量比为1～10：1；优选地，二者质量比为5：1。

所述抗肿瘤药物至少具有如下一种或多种用途：

1)缓解肿瘤外泌体带来的免疫抑制；

2)缓解肿瘤细胞表面PD-L1带来的免疫抑制；