[发明专利]一种降低细叶青冈插穗单宁总量的方法

说明书

本发明涉及青冈属植物插穗技术领域，具体涉及一种降低细叶青冈插穗单宁总量的方法，包括以下步骤：插穗处理：采集芽饱满的细叶青冈当年生枝条，剪成10～15cm的小段，得到插穗，将插穗下端斜剪，上端平剪，洗净；浸泡液的制备：取聚乙烯吡咯烷酮粉溶于质量分数为70%的丙酮水溶液中，待充分溶解混匀后得到浸泡液；插穗浸泡：将处理后的插穗下端放入浸泡液中，超声波条件下浸泡24h，冲洗干净即可。本发明利用PVP与细叶青冈中单宁结合形成络合物，该络合物不溶于水和其他有机溶剂，离心后极易除去，从而降低单宁含量；利用丙酮浸泡插穗，脱除插穗中部分单宁，并减少插穗内部单宁褐化；利用超声波辅助单宁降低，使降低效果更好。

技术领域

本发明涉及青冈属植物插穗技术领域，具体涉及一种降低细叶青冈插穗单宁总量的方法。

背景技术

单宁广泛存在于植物界中，并分布在植物的多个组织器官中，按其结构和性质可分为水解单宁，缩合单宁以及复杂单宁。单宁会影响植物的插条生根。目前青冈插穗成活率的研究主要是调节扦插基质、生根剂等因素，直接以青冈插穗成活率为标准来判定插繁殖方法的好坏，如授权公告号为CN103329711B的发明专利一种青冈嫩枝扦插繁殖方法，仅通过生根剂的使用提高扦插成活率，并未从内源物质对影响扦插生根的物质进行研究。目前无降低青冈插穗单宁总量的方法，尤其是降低细叶青冈插穗单宁总量的方法。

发明内容

本发明为了解决现有技术中无降低细叶青冈插穗单宁总量的方法的问题，提供了一种降低细叶青冈插穗单宁总量的方法。

为了实现上述目的，本发明的技术方案是：

一种降低细叶青冈插穗单宁总量的方法，包括以下步骤：

步骤1：插穗处理

采集芽饱满的细叶青冈当年生枝条，剪成10～15cm的小段，得到插穗，将插穗下端斜剪，上端平剪，洗净备用；

步骤2：浸泡液的制备

取聚乙烯吡咯烷酮（简写PVP）粉溶于质量分数为70%的丙酮水溶液中，所述聚乙烯吡咯烷酮粉和丙酮水溶液的质量体积比为1:20～1:30，待充分溶解混匀后得到浸泡液；

步骤3：插穗浸泡

将步骤1所得插穗下端放入浸泡液中，超声波条件下浸泡24h，然后冲洗干净即可。

进一步地，所述插穗下端45°斜剪。

进一步地，所述插穗斜剪切面上剪出0.2～0.3cm深的十字，可以加大插穗底部与浸泡液的接触面积，去除单宁效果更好。

进一步地，所述插穗浸泡步骤中的超声功率为200W，超声温度为30℃。

进一步地，所述浸泡液的液面位于插穗高度的1/4～1/3之间。若液面高于插穗高度的1/3，浸泡的插穗太长，容易对整个插穗造成损害；若液面低于插穗高度的1/4，浸泡的插穗太短，对枝条内单宁的提取效果不好。

进一步地，取浸泡前的部分插穗和浸泡后的部分插穗分别测定单宁总量，具体操作步骤为：将插穗剪成0.5cm的小段，杀青后烘干，然后粉碎，过80目筛，取0.5～1g过筛后的物料，按料液比1:20加入丙酮中，超声波提取20min，离心取上清液，反复提取3次，将上清液合并后定容，用福林酚试剂法进行测定，以没食子酸为标准品制作的标准曲线，得出插穗中单宁总量。

进一步地，所述烘干步骤为：将剪成小段的插穗，在103℃条件下杀青15min，在70℃条件下烘干至恒重。

进一步地，所述测定单宁总量步骤中的超声功率为200W，水浴温度为50℃。

通过上述技术方案，本发明的有益效果为：

1、本发明利用PVP与细叶青冈中单宁结合形成络合物，该络合物不溶于水和其他有机溶剂，极易除去，从而降低单宁含量；

2、本发明利用丙酮浸泡插穗，脱除插穗中部分单宁，并减少插穗内部单宁褐化；