[发明专利]一种pH/ROS响应型纳米药物递送系统及制备方法

权利要求书

1.一种pH/ROS响应型纳米药物递送系统及制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将mPEG-NH₂和Cbz-Lys-NCA混合后加入DMF溶解，25℃条件下搅拌后将反应体系倒入冰乙醚得到纯mPEG-b-PLL(Z)沉淀；

2)将步骤1)得到的mPEG-b-PLL(Z)加入到TFA与HBr/HOAc的混合溶液中，冰浴搅拌将反应体系倒入冰乙醚并对蒸馏水透析，将透析产物冷冻干燥得到mPEG-b-PLL；

3)将步骤2)得到的mPEG-b-PLL与D(Boc)、NHS、DCC与氮气环境下溶解于DMSO中，25℃条件下搅拌后过滤，用DMSO透析，再用蒸馏水透析，将透析产物冷冻得到PPD(Boc)；

4)将步骤3)得到的PPD(Boc)与α-TOS、NHS、DCC于氮气环境下溶解于DMSO中，25℃条件下搅拌后对DMSO和蒸馏水透析，将透析产物冷冻干燥得到PPT/D(Boc)；

5)将步骤4)得到的PPT/D(Boc)溶解于DCM中，将体系冰浴并滴加TFA搅拌，过滤将滤液加入冰乙醚中，对蒸馏水透析，将透析产物冷冻干燥得到PPT/D；

6)将步骤5)得到的PPT/D与DMA溶解于DMSO中，加入TEA和吡啶室温下搅拌过夜，对DMSO透析以纯化混合物，再经过二次透析去除DMSO，将透析产物冷冻干燥得到PPT/D(DMA)。

7)将步骤6)得到的PPT/D(DMA)溶解于DMF中并与DOX混合，避光搅拌，随后在反应体系滴入PBS搅拌，然后对水透析，得到的溶液温和离心弃沉淀得到PPT/D(DMA)@DOX纳米胶粒；

8)将步骤7)得到的PPT/D(DMA)@DOX纳米胶粒与pH敏感肽混合溶解于DMSO中，得到的均匀溶液逐滴加入到高速搅拌的水中自组装，然后用PBS透析，滤膜过滤，冷冻干燥得到PPT/D(DMA)@DOX-pHLIP自组装载药纳米粒子。

2.根据权利要求1所述一种pH/ROS响应型纳米药物递送系统及制备方法，其特征在于，步骤1)所述mPEG-NH₂和Cbz-Lys-NCA混合的摩尔比为1：30。

3.根据权利要求1所述一种pH/ROS响应型纳米药物递送系统及制备方法，其特征在于，步骤3)所述mPEG-b-PLL与D(Boc)、NHS、DCC混合的摩尔比为1：10：135：135。

4.根据权利要求1所述一种pH/ROS响应型纳米药物递送系统及制备方法，其特征在于，步骤4)所述PPD(Boc)与α-TOS、NHS、DCC混合的摩尔比为4：33：66：66。

5.根据权利要求1所述一种pH/ROS响应型纳米药物递送系统及制备方法，其特征在于，步骤6)所述PPT/D与DMA混合的摩尔比为1：2。

6.根据权利要求1所述一种pH/ROS响应型纳米药物递送系统及制备方法，其特征在于，步骤7)所述PPT/D(DMA)溶解于DMF中并与DOX混合具体为将DOX·HCl溶解于含TEA的DMF中搅拌，再将PPT/D(DMA)溶解于DMF并与上述体系混合；其中，PPT/D(DMA)、DOX·HCl、TEA的摩尔比为2：1：3。

7.根据权利要求1所述一种pH/ROS响应型纳米药物递送系统及制备方法，其特征在于，步骤8)所述pH敏感肽来源于细菌视紫红质的跨膜螺旋蛋白C，溶于水，是一条中等疏水性多肽；所述pH敏感肽能够在酸性条件下折叠形成稳定的TM螺旋结构，嵌入并跨越细胞膜进入细胞，在中性条件下，pH敏感肽的变化处于一种平衡过程。

8.根据权利要求1所述一种pH/ROS响应型纳米药物递送系统及制备方法，其特征在于，步骤8)所述PPT/D(DMA)@DOX-pHLIP自组装载药纳米粒子其内包裹抗癌药物，所述抗癌药物为具有芳香结构的抗肿瘤药物。

9.权利要求1-8任一项所述的pH/ROS响应型纳米药物递送系统用于肿瘤治疗药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的pH/ROS响应型纳米药物递送系统用于肿瘤治疗药物中的应用，其特征在于，所述抗肿瘤纳米药物递送系统在pH，ROS和pHLIP三重响应刺激条件下，PPT/D(DMA)@DOX纳米胶粒聚合物结构发生改变，促进包载的药物快速释放。