[发明专利]血清中脑部细胞来源的外泌体环状RNA作为脑梗诊断标志物的应用

说明书

本发明公开了血清中脑部细胞来源的外泌体环状RNA作为脑梗诊断标志物的应用。与脑梗相关的外泌体环状RNA标志物或其组合，包括下列中的任意一种或多种：circ‑0007290,circ‑0049637,circ‑0000607,circ‑0004808,circ‑0000097。检测所述的与脑梗相关的外泌体环状RNA标志物或其组合的试剂在制备脑梗诊断或辅助诊断试剂中的应用。发明人通过高通量测序和定量PCR在近200例患者中分析发现血清中的外泌体内的5种环状RNA可以有效的将脑梗患者从正常人和临床症状与脑梗相似的非脑梗患者中区分开，ROC曲线下面积均大于0.83，可作为检测标志物应用于脑梗的诊断。

技术领域

本发明属于医学诊断领域，涉及与脑梗相关的外泌体内环状RNA标志物及其应用。

背景技术

脑梗死又称缺血性脑卒中，是指局部脑组织因血液循环障碍，缺血、缺氧而发生的软化坏 死。脑梗死主要是由于供应脑部血液的动脉出现粥样硬化和血栓形成，使管腔狭窄甚至闭塞， 导致局灶性急性脑供血不足而发病；也有因异常物体(固体、液体、气体)沿血液循环进入脑 动脉或供应脑血液循环的颈部动脉，造成血流阻断或血流量骤减而产生相应支配区域脑组织软 化坏死者。脑梗死是严重危害人类健康的重大疾病，是具有高发病率和高致死率的一种神经系 统疾病，病死率平均10％～15％，致残率极高，且极易复发，复发性中风的死亡率大幅度增加。 目前脑梗死的诊断主要依赖于临床症状和影像学检查。其中，临床症状由于患者描述差异以及 易与脑部其它疾病发作症状类似而仅能用于粗略的初步判断；而影像学检查往往仅能在发病 6h后才能显示脑内变化。且对细小梗死部位不敏感，不能反映脑细胞损害的程度。此外，神 经影像学相关设备配置要求很高，开机检查费用也非常昂贵，导致大部分中小型医院无法配置 并进行检测。

外泌体是具有脂质双层膜结构、直径为30～100nm的微小囊泡。外泌体可以将包裹其内的 脂质、蛋白质、RNA等物质特异性运输到靶细胞调控靶细胞的功能，从而参与细胞与细胞之间 的相互调控。机体几乎所有细胞都可产生外泌体。组成中枢神经系统的细胞如星形胶质细胞、 小胶质细胞、少突胶质细胞、神经元等在病理、生理刺激时亦可分泌外泌体。外泌体在中枢神 经系统中广泛存在，携带重要的生物活性分子，在神经细胞间交流通讯发挥着重要的信使功能， 与中枢神经系统肿瘤、创伤、炎症感染、退行性疾病等发生发展关系密切，对中枢神经系统疾 病的诊断及治疗起着重要的作用。中枢神经系统分泌的外泌体被细胞分泌出来之后可以进入血 液中，这些血液中的外泌体可以反映中枢神经系统组成细胞的生理与病理状态，因此其成为一 种极具希望的潜在的中枢神经系统疾病诊断的标志物。在本发明中，我们研发了能够从血液中 分离脑部细胞来源外泌体的新方法，并且通过高通量测序和定量PCR技术鉴定了一组与脑梗相 关的脑部细胞来源外泌体的环状RNA。

发明内容

本发明的目的是提供与脑梗相关的外泌体环状RNA标志物或其组合。

本发明的另一目的是提供所述标志物或其组合的应用。

本发明的又一目的是提供检测所述标志物或其组合的试剂及其应用。

本发明的目的可通过以下技术方案实现：

与脑梗相关的外泌体环状RNA标志物或其组合,选自circ-0007290,circ-0049637, circ-0000607,circ-0004808,circ-0000097中的任意一种或多种；circ-0007290的序列如 SEQ ID NO.1所示，circ-0049637如SEQ ID NO.2所示，circ-0000607如SEQ ID NO.3所示， circ-0004808如SEQ ID NO.4所示，circ-0000097如SEQ ID NO.5所示。

检测所述的与脑梗相关的外泌体环状RNA标志物或其组合的试剂在制备脑梗诊断或辅助 诊断试剂中的应用。

作为本发明的一种优选，所述的检测所述的与脑梗相关的外泌体环状RNA标志物或其组合 的试剂选自PCR引物、探针、基因芯片。