[发明专利]一种美国鹧鸪性别快速鉴定方法及引物组

说明书

本发明公开了一种高效的美国鹧鸪性别快速鉴定方法，取美国鹧鸪样品，置于裂解液中裂解后，提取基因组DNA，PCR扩增，电泳，当扩增产物只出现一条514bp特异性扩增条带时判定为雄性；当扩增产物同时出现514bp和360bp两条特异性扩增条带时判定为雌性；若此条带未出现514bp条，则不能判定检测样品的性别。本发明步骤简单且能快速且有效地区分美国鹧鸪的性别，解决了目前的禽类性别鉴定方法存在对美国鹧鸪无法有效区分性别、步骤繁琐、时间长的问题。

技术领域

本发明涉及动物鉴定方法，具体涉及一种美国鹧鸪性别快速鉴定方法。本发明还涉及美国鹧鸪性别快速鉴定引物组。

背景技术

美国鹧鸪，学名为石鸡(Alectoris chukar)，是一种饲养价值极高的珍禽。我国早在上世纪八十年度就开始从美国引进饲养，已被国家畜禽遗传资源委员会列为特禽，在禽类市场已占有一席之地。美国鹧鸪幼雏个体小，难以通过翻肛等传统方法鉴定性别。通过外形、叫声等特征鉴定性别的方法需等到8个月性成熟进入产蛋前期才能够进行。因此，不管是肉鸪还是在种鸪配对前期，通常是不分性别混合饲养。然而，不同性别的饲料转化率存在差异，公鸪留种数量也显著少于母鸪。如果能在幼雏阶段进行性别鉴定，分性别饲养，并且及早淘汰不必要的公鸪，则可以显著提高配对成功率，提高生长齐整性，从而有效增加经济效益，因此进行早期性别鉴定具有重要的意义。

目前，禽类性别鉴定的分子方法通常是从性别决定基因CHD设计特异引物，通过采取血液提取基因组DNA，进而扩增、电源来区别性别特异条带来实现，步骤繁琐，耗时长。现有的方法无法有效区分美国鹧鸪性别，如只扩增出一条带、或扩增效果不稳定，亟需设计新的特异引物以及优化后续操作方法对美国鹧鸪进行性别鉴定。并且，美国鹧鸪易受惊吓，采血进行性别鉴定的方法容易对美国鹧鸪产生应激伤害。

发明内容

针对目前的禽类性别鉴定方法存在对美国鹧鸪无法有效区分性别、步骤繁琐、时间长的问题，本发明提供一种高效的美国鹧鸪性别快速鉴定方法。

实现本发明发明目的的其中的一个技术方案为：一种高效的美国鹧鸪性别快速鉴定方法，取美国鹧鸪样品，置于裂解液中裂解后，提取基因组DNA，PCR扩增，电泳；当电泳结果中，扩增产物只出现一条514bp特异性扩增条带时判定为雄性(ZZ型)；当扩增产物同时出现514bp和360bp两条特异性扩增条带时判定为雌性(ZW型)；514bp条带为雌、雄个体共有片段，若此条带未出现，则不能判定检测样品的性别；所述PCR扩增采用的引物如下：

上游引物5’-CTGATTTTCTCTCAGATGGTGAG-3’

下游引物5’-GATCCATCAAGTCTCTAAAGAG-3’。

所述美国鹧鸪样品包括含羽髓的羽毛、口腔擦拭物和血液样品。本发明优选采用含羽髓的羽毛和口腔擦拭物，这样可以实现美国鹧鸪的无损性别鉴定。

本发明另一个目的在于提供一组用于有效进行美国鹧鸪性别鉴定的引物组。

具体地，所述引物组是根据美国鹧鸪的性别决定基因CHD设计特异性引物，其序列如下：

上游引物5’-CTGATTTTCTCTCAGATGGTGAG-3’

下游引物5’-GATCCATCAAGTCTCTAAAGAG-3’。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1.本发明提供的方法，使用特异性引物组对性别决定基因CHD进行PCR扩增，扩增效果稳定，而且能够出现514bp和360bp两条特异性条带，有效地区分美国鹧鸪性别，配合翅号使用可以用于选育工作。

2.本发明提供的特异性引物组对美国鹧鸪性别决定基因CHD的特异性较强，使得性别鉴定结果的检出率高达98.3％。