[发明专利]葡苷寡糖及其制备方法和应用有效
申请号: | 202110550204.2 | 申请日: | 2021-05-20 |
公开(公告)号: | CN113337557B | 公开(公告)日: | 2022-11-15 |
发明(设计)人: | 周中凯;肖长昊 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | C12P19/14 | 分类号: | C12P19/14;C12N9/24;C12N1/20;A61K31/702;A61P3/04;C12R1/07 |
代理公司: | 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 | 代理人: | 杨欢 |
地址: | 300000 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 寡糖 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种葡苷寡糖的制备方法,其特征在于,包括下述步骤:
水解:分别称量下述质量份组分:瓜尔豆胶1%,刺槐豆胶0.8%,魔芋粉1%放到不锈钢高速搅拌反应罐里,加入96.2%的水进行溶解;加入1%的葡甘低聚糖酶液,充分水解设置参数45°C,180 r/min,4 h;
灭酶:将水解结束的液体不锈钢高速搅拌反应罐中进行灭酶处理,设置参数121°C,20min;
脱色:向灭酶后的液体中加入0.1%食用级活性炭,进行脱色处理,设置参数180 r/min,1 h;
过滤:使用过滤机,获得寡糖清液;
浓缩:使用多效浓缩机,三效浓缩,将清液浓缩为15%的浓缩液;
喷雾干燥:使用喷雾干燥机将上清液用喷雾干燥机喷成粉末,收取粉末,进风的温度为180°C;
检验包装:人工检验粉末颗粒的理化性质并用粉末包装机进行包装,每500 g包一小包装,每10小包装包一大包装;
其中,所述的葡甘低聚糖酶液采用下述方式制备:
(1)淀粉芽孢杆菌的培养;
培养基的制备:称取下述质量份组分:蛋白胨1%,牛肉膏3%,氯化钠0.5%,琼脂1.5%,蒸馏水94%;将蛋白胨、牛肉膏、氯化钠置于三角瓶中并加入94%蒸馏水;经混匀后用1 mol/L的氢氧化钠调节pH至7.2–7.4,最后加入称量好的琼脂,混匀备用;
种子培养基的制备:称取下述质量份组分:无水葡萄糖1%,酵母粉0.3%,麦芽汁提取粉0.3%,胰蛋白胨0.5%,蒸馏水97.9%,混匀;装入三角瓶中,每瓶600 mL,备用;将上述配制好的培养基与事先准备好的20支15×150 mm规格的试管,用报纸包好后,121°C-122℃,20min,备用;
菌的培养:
将灭完菌的完全培养基和含有种子培养基的试管放到超净台内,紫外照射10 min;关闭紫外灯,把完全培养基倒入试管中,每个试管倒1/3,侧倒,使其呈斜面冷却凝固;把4°C冰箱中的菌种K018在37°C,30 min培育箱里活化;用接种用的环挑起菌种接种到斜面培养基上,划“之”字型;之后放到培育箱中,斜面培养,37°C,24 h;
(2)葡甘低聚糖酶液获取:
用接种环把菌种缓慢地转移到90 ml种子的接种环中养基的三角瓶中,放入气浴摇床上,30°C,200 r/min,20 h;然后,在火焰圈的作用下迅速将培养液倒入事先已配制好的种子培养液的种子发酵罐中,设定参数30°C,20 h;原培养液与罐内配制的种子培养液比例为1:9;
配制发酵培养基:称取下述质量含量组分:称取葡萄糖3.8%,磷酸氢钾0.2%,硫酸镁0.1‰,硫酸铵0.8‰,酵母粉0.9%,置于发酵液发酵罐中,加入95%的蒸馏水,开动搅拌器混匀;用1mol/L的氯化钠调节pH至7.5,开动搅拌器混匀;
取种子发酵罐中的培养液加入到发酵液发酵罐中,种子液与发酵液的比例为1:9,设定参数30°C,72 h;
过滤:使用过滤机,获得清液,过滤机事先灭菌;
酶液冷存:将过滤后的酶液放到储液罐中4°C储存。
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