[发明专利]用于宠物人兽共患鹦鹉热衣原体病的LAMP引物及环介导等温扩增检测试剂盒有效
| 申请号： | 202110550322.3 | 申请日： | 2021-05-20 |
| 公开（公告）号： | CN113136445B | 公开（公告）日： | 2022-04-01 |
| 发明（设计）人： | 张海云;杨秀环;李壹;唐艳荣;张小梅;王雅琴;曹院章;何宏轩 | 申请（专利权）人： | 北京市朝阳区动植物疫病预防控制中心(北京市朝阳区农产品质量安全综合检测站) |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京市盈科律师事务所 11344 | 代理人： | 刘立国 |
| 地址： | 100121 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 宠物 人兽共患 鹦鹉 衣原体 lamp 引物 环介导 等温 扩增 检测 试剂盒 | ||
1.一种用于检测鹦鹉热衣原体的LAMP引物，其特征在于，该LAMP引物包括：
引物F3：5’-CTAAGCATAATCTTTAGAGGTGAGTATGA-3’，即SEQ ID NO.2，
引物B3：5’-CATAATCTCCGTAGTATCCTGCG-3’，即SEQ ID NO.3，
引物FIP：5’-GGTTCCCTACAGGCAAGGCTAAACTCTTGAAATCGGCATTATTGTT-3’，即SEQ IDNO.4，
引物BIP：5’-TGTGGGAAGGTGCTTCAGGAGGGATGCTAATGGCGTCACA-3’，即SEQ ID NO.5，引物LoopF：5’-AGGAGAGAGCGGAACCC-3’，即SEQ ID NO.6，
引物LoopB：5’-ATCCTTGCGATCCTTGCG-3’，即SEQ ID NO.7。
2.一种含有权利要求1所述的LAMP引物的宠物人兽共患鹦鹉热衣原体病环介导等温扩增检测试剂盒。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括dNTPs、Bst DNA聚合酶、Buffer、Mg2+中的至少一种。
4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括模板DNA。
5.权利要求1所述的LAMP引物在制备宠物人兽共患鹦鹉热衣原体病环介导等温扩增检测试剂盒的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于其包括以下步骤：
1)提取样品中的DNA；
2)以步骤1)中提取的DNA为模板，利用所述LAMP引物进行扩增反应；
3)分析扩增产物。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于步骤1)中样本裂解液组成是：25mM tris-HCL、5mM EDTA、0.1％SDS、1％tween-20。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于扩增反应条件：反应时间为30-40分钟，反应温度为64-65℃。
9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于步骤3)具体为：向步骤2)的扩增产物中加入SYBR Green I染料，根据显色情况判定结果：显示荧光绿为阳性，橙色为阴性。
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