[发明专利]一种用于膀胱修复的复合支架材料及其制备方法

权利要求书

1.一种用于膀胱修复的复合支架材料的制备方法，其特征在于，所述用于膀胱修复的复合支架材料的制备方法包括以下步骤：

步骤一，进行功能胶原支架材料的制备：利用胶原膜缠绕模具，得到缠绕胶原膜的模具；在所述缠绕胶原膜的模具上用含有胶原的液体涂裹，取出所述模具，得到所述胶原管；利用神经丝包被所述胶原管，即可制备得到所述功能胶原支架材料，备用；

步骤二，进行复合电纺丝纤维的制备：将聚(3-羟基丁酸酯-4-羟基丁酸酯)共聚物粉末溶于二氯甲烷和二甲基甲酰胺的复合溶剂中，均匀搅拌溶解，随后加入左旋聚乳酸，磁力搅拌，得到电纺丝纤维溶液；称取表柔比星，加入所述电纺丝纤维溶液中，继续磁力搅拌至表柔比星完全溶解，得到复合电纺丝纤维混合溶液；将所述复合电纺丝纤维混合溶液加入至注射器中进行静电纺丝，收集电纺丝，洗涤，冷冻干燥，即可得到所述复合电纺丝纤维，备用；

所述进行静电纺丝包括：

用注射器抽取溶解好的复合电纺丝纤维混合溶液，固定在恒流泵上；将高压静电发生器的正极接到针头上，负极连接到接收板上，接收板上铺有一层铝箔纸，用于接收静电纺纤维，开始静电纺丝；每次纺丝2h，纺丝完成后，将铝箔纸取下，即可收集电纺丝；

步骤三，进行葡聚糖-壳聚糖-VEGF缓释微球的制备：将1～10mg/ml的rhVEGF168溶液与2～4％w/v的葡聚糖水溶液搅拌，得混合溶液；将1～2.5ml 0.1％w/v的壳聚糖溶液逐步滴加于混合溶液中，搅拌均匀；加入60～95μl的硫酸锌，搅拌20～30min，采用3～5％的甘露醇孵育，离心并重悬，即可得到所述葡聚糖-壳聚糖-VEGF缓释微球，备用；

所述离心并重悬包括：

将混合液收集到无菌的离心容器中；将离心容器放入到离心设备中进行离心；弃去离心后混悬液的上层液体，加入适量的悬浮介质，令沉淀层重新悬浮于悬浮介质中；将沉淀层在悬浮介质中分散均匀；利用移液枪重复吸吹法、振荡器分散法或者手动振打方式将混合液体分散均匀后，即可得所述葡聚糖-壳聚糖-VEGF缓释微球；

步骤四，进行复合支架材料的制备：按照质量份数称取原料；将功能胶原支架材料、可降解高分子材料、复合电纺丝纤维和生长因子依次按照不同梯度浸入重悬的不同孔径的所述葡聚糖-壳聚糖-VEGF缓释微球溶液中，于10～12℃的条件下静置10～12h；完成梯度浸渍处理后，将混合微球溶液置于50℃的条件下干燥处理30～50min，即可制备得到所述用于膀胱修复的复合支架材料。

2.如权利要求1所述的用于膀胱修复的复合支架材料的制备方法，其特征在于，步骤二中，所述磁力搅拌的条件为：利用磁力搅拌器搅拌溶解2～4h，溶解温度为55～65℃。

3.如权利要求1所述的用于膀胱修复的复合支架材料的制备方法，其特征在于，步骤二中，所述聚(3-羟基丁酸酯-4-羟基丁酸酯)和左旋聚乳酸的质量配比为1：0.6～1.2，所述表柔比星与聚(3-羟基丁酸酯-4-羟基丁酸酯的质量比为0.8～1.2：5。

4.如权利要求1所述的用于膀胱修复的复合支架材料的制备方法，其特征在于，步骤二中，所述静电纺丝的条件为：将注射器用针头喷嘴固定，在30～65℃下设置针头与接收器之间距离为15～20cm，电压为5～30kv，所述注射器的推进速度为0.1～12.5ml/h。

5.如权利要求1所述的用于膀胱修复的复合支架材料的制备方法，其特征在于，步骤三中，所述rhVEGF168溶液与葡聚糖水溶液的搅拌速率为700～900rpm/min，搅拌时间为20～30min。

6.如权利要求1所述的用于膀胱修复的复合支架材料的制备方法，其特征在于，步骤四中，所述按照质量份数称取原料包括：按照质量份数计，称取功能胶原支架材料30～50份、可降解高分子材料20～30份、复合电纺丝纤维15～30份、生长因子8～15份、葡聚糖6～12份、rhVEGF168溶液5～10份、壳聚糖4～8份、硫酸锌3～5份、甘露醇2～4份以及灭菌去离子水。