[发明专利]一种核酸适配体及其在检测免疫抑制剂中的应用在审
申请号: | 202110553740.8 | 申请日: | 2021-05-20 |
公开(公告)号: | CN113444728A | 公开(公告)日: | 2021-09-28 |
发明(设计)人: | 不公告发明人 | 申请(专利权)人: | 上海奥根诊断技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;G01N33/53;G01N33/58 |
代理公司: | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人: | 张均莹 |
地址: | 201114 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 核酸 适配体 及其 检测 免疫抑制剂 中的 应用 | ||
1.一种核酸适配体,其特征在于,所述核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:1、SEQID NO:2和SEQ ID NO:3中的至少一种。
2.如权利要求1所述的一种核酸适配体,其特征在于,所述核酸适配体上修饰有荧光标记。
3.如权利要求2所述的一种核酸适配体,其特征在于,当核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:1时,所述荧光标记为FAM标记;当核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:2时,所述荧光标记为VIC标记;当核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:3时,所述荧光标记为ROX标记。
4.一种用于检测免疫抑制剂的产品,其特征在于,所述产品包括氧化石墨烯以及权利要求1~3任一项所述的核酸适配体,或者,所述产品包括纳米金以及权利要求1~3任一项所述的核酸适配体,或者,所述产品包括氧化石墨烯、纳米金以及权利要求1~3任一项所述的核酸适配体。
5.如权利要求4所述的一种用于检测免疫抑制剂的产品,其特征在于,所述免疫抑制剂包括他克莫司、环孢素A和霉酚酸酯中的至少一种。
6.如权利要求5所述的一种用于检测免疫抑制剂的产品,其特征在于,当免疫抑制剂为他克莫司时,所述核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:1;当免疫抑制剂为环孢素A时,所述核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:2;当免疫抑制剂为霉酚酸酯时,所述核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:3。
7.一种检测样本中免疫抑制剂浓度的方法,其特征在于,所述方法包含如下步骤:
孵育步骤:将权利要求1~3任一项所述的核酸适配体和待测样本混合后孵育,得到孵育液;将氧化石墨烯和孵育液混合后孵育,得到待测体系;
检测步骤:分别检测孵育液和待测体系的荧光强度;根据孵育液和待测体系的荧光强度变化,以及,荧光强度变化与免疫抑制剂浓度之间的线性关系,计算得到待测样本中免疫抑制剂的浓度。
8.如权利要求7所述的一种检测样本中免疫抑制剂浓度的方法,其特征在于,所述免疫抑制剂包括他克莫司、环孢素A和霉酚酸酯中的至少一种;
当免疫抑制剂为他克莫司时,所述荧光强度变化与免疫抑制剂浓度之间的线性关系为Y=0.7144X-0.1389,式中,X为免疫抑制剂浓度,Y为加入待测体系荧光强度与孵育液荧光强度的比值;
当免疫抑制剂为环孢素A时,所述荧光强度变化与免疫抑制剂浓度之间的线性关系为Y=0.8921X-0.1423,式中,X为免疫抑制剂浓度,Y为加入待测体系荧光强度与孵育液荧光强度的比值;
当免疫抑制剂为霉酚酸酯时,所述荧光强度变化与免疫抑制剂浓度之间的线性关系为Y=0.9124X-0.2322,式中,X为免疫抑制剂浓度,Y为加入待测体系荧光强度与孵育液荧光强度的比值。
9.如权利要求7或8所述的一种检测样本中免疫抑制剂浓度的方法,其特征在于,所述孵育的条件为:避光,20~30℃,15~45min。
10.权利要求1~3任一项所述的核酸适配体、权利要求4~6任一项所述的产品或权利要求7~9任一项所述的方法在免疫抑制剂浓度检测中的应用。
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