[发明专利]D-阿洛酮糖-3-差向异构酶固定化酶及其制备方法有效
申请号: | 202110560263.8 | 申请日: | 2021-05-21 |
公开(公告)号: | CN113444716B | 公开(公告)日: | 2022-09-27 |
发明(设计)人: | 高润香;蔡侠;姚宏伟;东刚;贾伟;王水淋 | 申请(专利权)人: | 诚志生命科技有限公司;北京诚志高科生物科技有限公司;江西诚志生物工程有限公司 |
主分类号: | C12N11/087 | 分类号: | C12N11/087;C12N11/082;C12N9/90 |
代理公司: | 北京彩和律师事务所 11688 | 代理人: | 闫桑田 |
地址: | 100084 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 阿洛酮糖 差向异构 固定 及其 制备 方法 | ||
1.一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶(简称DPE)固定化酶,其特征在于,包括酶载体和DPE;
所述酶载体为大孔树脂;所述酶载体与DPE通过共价键结合在一起;
所述酶载体为中性带有疏水性骨架的带有环氧基团的聚丙烯酸类大孔树脂;
所述DPE与酶载体的酶活质量比(U/g)为(70~400):1。
2.根据权利要求1所述的DPE固定化酶,其特征在于,所述DPE与酶载体的酶活质量比(U/g)为(100~250):1。
3.根据权利要求1所述的DPE固定化酶,其特征在于,所述DPE固定化酶的酶活为20U/g~60U/g。
4.根据权利要求1所述的DPE固定化酶,其特征在于,所述DPE固定化酶的酶活为35U/g~60U/g。
5.一种DPE固定化酶的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
将DPE酶液与酶载体混合,摇床振荡,形成混合液,弃去所述混合液的上层液体,洗涤所述混合液的下层固体,从而得到DPE固定化酶;
所述酶载体为大孔树脂;所述酶载体与DPE通过共价键结合在一起;
所述酶载体为中性带有疏水性骨架的带有环氧基团的聚丙烯酸类大孔树脂;
所述DPE与酶载体酶活质量比(U/g)为(70~400):1。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述摇床振荡的时间为10~36h。
7.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述摇床振荡的时间为12~20h。
8.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述DPE与酶载体混合后,摇床振荡反应的温度为15~35℃。
9.根据权利要求8所述的制备方法,其特征在于,所述摇床振荡反应的温度为20~25℃。
10.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述DPE与酶载体酶活质量比(U/g)为(100~250):1。
11.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述DPE固定化酶的酶活为20U/g~60U/g。
12.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述DPE固定化酶的酶活为35U/g~60U/g。
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