[发明专利]一种果蔬中啶虫脒双模态快速检测方法

权利要求书

1.一种果蔬中啶虫脒双模态快速检测的方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)锆基金属有机骨架的制备

S1.取四氯化锆和2-氨基对苯二甲酸溶于N,N-二甲基甲酰胺中，超声震荡混匀，并加入冰醋酸，继续搅拌得到混合溶液，转移反应釜中，在一定温度条件下进行反应，反应后将产物依次用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇清洗数次，并在真空干燥箱中干燥得到纯化的锆基金属有机骨架；

S2.啶虫脒适配体修饰锆基金属有机骨架：将啶虫脒适配体溶液与1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺混合，在常温下搅拌孵化后加入步骤S1中纯化的锆基金属有机骨架，常温下孵化，然后将产物进行离心，得到的固体沉淀即为啶虫脒适配体修饰的锆基金属有机骨架；

(2)电化学信号和荧光信号的获取

S1.电极预处理：将金电极用不同粒径的氧化铝粉末在抛光绒布上抛光打磨后在无水乙醇和去离子水中依次超声处理，用氮气吹干；然后置于硫酸溶液中进行循环电位扫描，观察其氧化与还原峰电位，直到其氧化和还原峰完全重合，得到活化金电极；

S2.金电极啶虫脒适配体互补链修饰：将啶虫脒适配体互补链溶液滴加在步骤(2)的S1中所述的活化金电极表面，常温下孵化后用去离子水冲洗表面未结合的啶虫脒适配体互补链溶液；然后再滴加牛血清蛋白溶液，室温下放置一段时间后用去离子水冲洗电极表面，得到啶虫脒适配体互补链修饰的金电极；

S3.脉冲伏安法测定：配制不同浓度的啶虫脒标准样品，分别记为C₁,C₂,……,C_n-1,C_n，n为正整数；然后在啶虫脒标准样品中加入步骤(1)的S2中得到的啶虫脒适配体修饰的锆基金属有机骨架，得到混合溶液；将步骤(2)的S2中得到的啶虫脒适配体互补链修饰的金电极插入上述混合溶液中，搅拌富集一段时间，使啶虫脒适配体修饰的锆基金属有机骨架通过碱基互补配对连接在啶虫脒适配体互补链修饰的金电极上；富集完成后，停止搅拌，使溶液静置一段时间，该过程中啶虫脒适配体修饰的锆基金属有机骨架附着在啶虫脒适配体互补链修饰的金电极表面，即得到工作电极；

S4.电信号获取阶段：对步骤(2)的S3中所述的工作电极进行电位扫描，电位从1.2V扫描到0.5V，得到工作电极的电信号，利用工作电极测量并记录不同浓度啶虫脒标准样品的电信号强度，记为E₁,E₂,……,E_n-1,E_n，n为正整数；

S5.荧光信号获取阶段：每测量一个浓度的啶虫脒标准样品的电信号强度后，取出工作电极用磷酸盐缓冲液冲洗工作电极表面，并收集清洗此浓度的磷酸盐缓冲液，与此浓度的啶虫脒标准样品混合；如此操作后，会得到不同浓度的啶虫脒标准样品与其清洗后磷酸盐缓冲液的混合液，均定容至某一相同体积，然后分别取定容后的溶液放入石英比色皿中，设置荧光光谱仪的激发波长，测量并记录其最佳荧光发射强度，记为F₁,F,……,F_n-1,F_n，n为正整数；

(3)啶虫脒浓度的快速检测

S1.电化学快速检测预测模型：根据步骤(2)的S4中所述的电信号强度E₁,E₂,……,E_n-1,E_n与不同浓度的啶虫脒标准样品C₁,C₂,……,C_n-1,C_n建立模型，得到啶虫脒的电化学快速检测预测模型E＝f(X)，其中E为电化学的电流，X为啶虫脒浓度，n为正整数；

S2.荧光快速检测预测模型：将步骤(2)的S5中所述的荧光发射强度F₁,F,……,F_n-1,F_n与不同浓度的啶虫脒标准样品C₁,C₂,……,C_n-1,C_n建立模型，得到啶虫脒的荧光快速检测预测模型F＝f(X)，其中F为荧光发射强度，X为啶虫脒浓度，n为正整数；

S3.果蔬中啶虫脒浓度的快速预测：取待测果蔬样品剪碎或搅碎后加入样品通用提取液，充分振荡混匀，即为待测液；按照步骤(2)的S4和S5中测定电化学信号和荧光信号的方法分别得到电信号强度和荧光发射强度，将其分别代入电化学快速检测预测模型和荧光快速检测预测模型，即得到电化学法和荧光法测定的啶虫脒快速预测浓度值；将电化学法和荧光法测定的啶虫脒快速预测浓度值，利用SPSS进行组间差异分析；若两组数据间有显著性差异，则数据弃之；若两组数据间无显著性差异，则取以上数据的平均值为果蔬中啶虫脒浓度，实现啶虫脒浓度的快速检测。