[发明专利]一种用于结直肠癌早期诊断的生物标志物组合物及应用

说明书

本发明属于结直肠癌检测领域，具体涉及一种用于结直肠癌早期诊断的生物标志物组合物及应用。本发明具体公开了生物标志物在结直肠癌早期诊断中的应用，通过测定该生物标志物的含量和粪便隐血实验结合用于结直肠癌的早期诊断，具有成本低，检测方便，准确度高，灵敏度好、特异性强的优点，能够避免肠镜侵入式检查导致的痛苦、不适及并术后发症，显著降低结直肠癌早期诊断的假阳性率，可以广泛用于结直肠癌的早期诊断。

本申请要求申请日为2020年5月27日、申请号为CN202010458730.1、发明名称为“一种用于结直肠癌早期诊断的生物标志物组合物及应用”的在先申请的优先权，该在先申请的全部内容均已在本申请中体现。

技术领域

本发明属于结直肠癌检测领域，具体涉及一种用于结直肠癌早期诊断的生物标志物组合物及应用。

背景技术

结直肠癌是临床常见肿瘤，具有高发病率及高死亡率，在中国新增癌症病例中结直肠癌发病率在男性中排第四，在女性中排第三，在全球范围排第二位。如果能在早期检测到结直肠癌病变并通过手术切除，则存活率超过90％，而晚期则降低至13％，因此，早筛是降低结直肠癌死亡率最有效的手段。发达国家已经建立了有效的早期筛查计划和诊断技术，成为选择治疗方法并预测结果的方法的重要组成部分，使得死亡风险和治疗质量都获得了很大的改善，这为我们提供了指导与借鉴。

目前对于筛查方法，结肠镜检查仍然是明确诊断的金标准。虽然它有效，但它也可能引起恐惧，尴尬，可能会导致严重的并发症，参与率低，不适合早期筛查。其它的侵入式筛查如气钡灌肠、核磁共振成像等，有技术难度大，费用高等缺点。而非侵入式的粪便隐血检查有：基于愈创木脂化学法(gFOBT)；免疫法等，均存在灵敏度低、易受饮食用药影响的问题。《结直肠癌早期筛查指南》推荐：高敏gFOBT每年检查一次，高敏免疫化学法每年检查一次，但这种方法具有较高的假阳性率，对早期息肉敏感性低。

粪便基因是另一种可靠的生物标志物，可以通过DNA检测来进行早期筛查。多靶点基因检测已被《结直肠癌早期筛查指南》推荐用于结直肠癌筛查，每三年一次，但是价格昂贵，对腺瘤诊断效果差，尚未在亚洲人群进行验证。FDA批准的Cologuard(大肠卫士)是一种有效的分子(基因突变，甲基化和潜血实验)筛查技术，是将粪便潜血检测与血液中肿瘤相关DNA标志物检测相结合，定量检测血液中与结直肠肿瘤相关的DNA标志物，及人类粪便中存在的潜血红蛋白，实现结直肠癌的早期诊断，但是其价格昂贵，且需要抽血检查，并且对腺瘤的诊断效果较差。因此，需要我们开发灵敏、无创、经济的无创筛查技术来改善现状。

研究表明肠道生物群在人类健康和许多疾病的过程中发挥着重要作用，可用作诊断，预后和分层等生物标志物，并且可以通过患者粪便进行检测。例如，中国专利CN106574294A，公开了一种通过定量PCR从人类粪便样本诊断结肠直肠癌的方法、引物及试剂盒，通过检测粪便中一种或多种16SrDNA细菌序列的量化水平，对人类对象的CRC和/或腺瘤性息肉进行早期检测、风险筛查和监控的方法，但是这种方法对结直肠癌的检测准确率和灵敏度较低。中国专利CN110512015A，公开了一种肠癌生物标志物组合物及其应用，所述生物标志物组合物包括梭菌科、卟啉单胞菌属、消化链球菌属、具核梭杆菌和微单胞菌属。发明人采集大量结直肠癌和癌前病变(结直肠腺瘤和结直肠肿瘤性息肉)患者和健康个体的粪便样本，利用高通量测序、实时荧光定量PCR、高分辨率熔解曲线法或生物芯片等方法，通过对粪便样本中微生物的丰度和相对含量差异进行对比分析和验证，确定了与结直肠癌和癌前病变相关的微生物，采用上述微生物的不同组合作为生物标志物组合物，通过检测生物标志物组合物在样本中的丰度，预测是否有结直肠癌发生。但是该方法检测特异性差。