[发明专利]一种通过构建固液两相可分离再生体系验证抗氧化剂间再生作用的方法

权利要求书

1.一种通过构建固液两相可分离再生体系验证抗氧化剂间再生作用的方法，其特征在于，步骤如下：

(1)可分离再生体系液相的制备：

将脂溶性抗氧化剂溶解在甲醇中，得到脂溶性抗氧化剂溶液，即为可分离体系再生体系液相；

(2)含水溶性抗氧化剂的β-环糊精包合物的制备：

(2.1)制备β-环糊精溶液和水溶性抗氧化剂水溶液：称取β-环糊精于去离子水中，水浴下加热充分溶解，得到β-环糊精溶液；将水溶性抗氧化剂溶解于去离子水中制备水溶性抗氧化剂水溶液；

(2.2)制备含水溶性抗氧化剂的β-环糊精溶液：恒速向β-环糊精溶液中滴加水溶性抗氧化剂水溶液，磁力水浴搅拌锅中磁力搅拌；

(2.3)保藏与备用：将步骤(2.2)制备的溶液冷却后置于4℃冰箱结晶，待不再有晶体析出后，过滤收集晶体，漂洗、真空干燥得到固体；

(3)固液两相可分离再生体系中抗氧化剂间有无再生作用的验证：

(3.1)再生组的设置：

将步骤(2)中制备的含水溶性抗氧化剂的β-环糊精包合物固体放入步骤(1)制备的可分离再生体系液相中，获得固液两相可分离体系，为再生组；

(3.2)对照组的设置：

将同等质量的不含水溶性抗氧化剂的β-环糊精包合物放入步骤(1)制备的可分离再生体系液相中，为对照组；

(3.3)再生作用的验证：再生组和对照组密封暗处摇床振荡反应，控制反应时间相同，利用DPPH清除自由基法测定再生组和对照组中溶液的抗氧化能力；当再生组溶液的抗氧化能力高于对照组时，则表明所添加的水溶性抗氧化剂能够再生液相中的抗氧化剂；若两者无明显差异，则说明两种抗氧化剂之间不存在再生作用。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤 (2.1)中β-糊精水浴加热温度为60℃。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤 (2.2)中磁力水浴搅拌锅温度为60℃，搅拌时间为6h。

4.根据权利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，所述步骤 (3.3)中，DPPH清除自由基法的具体步骤为：配置0.1mmol/L DPPH-甲醇溶液。

5.根据权利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，将抗氧化剂与DPPH于室温下避光反应30min，待反应稳定后，于517nm处紫外检测记录吸光度。

6.根据权利要求1～5任一所述的方法，其特征在于，所述脂溶性抗氧化剂为TBHQ特丁基对苯二酚。

7.根据权利要求1～6任一所述的方法，其特征在于，步骤(2.1)为，称取30gβ-环糊精于420g去离子水中，60℃水浴下加热充分溶解，得到β-环糊精溶液。

8.根据权利要求1～7任一所述的方法，其特征在于，步骤(2.2)中，磁力水浴搅拌锅中60℃磁力搅拌6h。

9.根据权利要求1～8任一所述的方法，其特征在于，所述脂溶性抗氧化剂溶液的浓度为1mmol/L。

10.根据权利要求1～9任一所述的方法，其特征在于，使水溶性抗氧化剂结合到β-环糊精形成固体的方法为结晶法。