[发明专利]甲基营养型芽孢杆菌wswGH-10的抗菌蛋白的应用及分离纯化方法

说明书

本发明涉及甲基营养型芽孢杆菌wswGH‑10的抗菌蛋白的应用及分离纯化方法，属于抗菌药物技术领域。本发明提供了甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)wswGH‑10的抗菌蛋白在制备抑菌的药物中的应用，所述抗菌蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述抗菌蛋白在100℃以下环境下、中性和酸性环境中、紫外线照射环境下以及光照环境下均具有很好的抑菌活性，特别能抑制尖孢镰刀菌和/或立枯丝核菌的活性，能高效用于抑菌的药物的生产，有利于新型生物农药的开发。

技术领域

本发明涉及抗菌药物技术领域，具体涉及甲基营养型芽孢杆菌wswGH-10的抗菌蛋白的应用及分离纯化方法。

背景技术

高浓度的化学杀菌剂增加了农药残留的风险，不仅易对环境造成污染，而且会严重影响人们的健康，同时会诱导病菌产生抗药性而降低杀菌效果。目前生物防治正在逐步取代传统的化学防治。现有生物农药主要是活菌体制剂，而它们大多是以杀死或抑制病原菌为靶标，而忽视了调动植物自身免疫能力的筛选指标。在使用时常常有见效慢、防效不稳定现象，在储藏过程中有货架期短等不利现象。现在人们越来越多的把注意力投入到一类新型物质上，这就是抗菌蛋白或抗菌肽。抗菌蛋白或抗菌肽是许多生防微生物都能分泌的一类抗生物质，它具有抑制病菌的广谱性和高效性、对人畜无毒、对环境无污染的优良特性，并且它能通过诱导植物免疫，提高植物抗性的途径起到减轻病害发生，降低农药使用量，促进植物生长和提高产量的作用。同时能提高作物的品质，生产上可以减少或不使用化学农药，生产的产品可以达到绿色产品和有机食品的要求，特别是在有机蔬菜和果品生产中将发挥重要作用。而且避免了环境对活菌体作用而影响其防效的现象。因此，抗菌蛋白在开发新型生物农药中比活菌体制剂更具优势。

发明内容

本发明的目的在于提供甲基营养型芽孢杆菌wswGH-10的抗菌蛋白的应用及分离纯化方法。本发明所述抗菌蛋白在100℃以下环境下、中性和酸性环境中、紫外线照射环境下以及光照环境下均具有很好的抑菌活性，特别能抑制尖孢镰刀菌和/或立枯丝核菌的活性，能高效用于抑菌的药物的生产，有利于新型生物农药的开发。

本发明提供了甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)wswGH-10的抗菌蛋白在制备抑菌的药物中的应用，所述抗菌蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供了甲基营养型芽孢杆菌wswGH-10的抗菌蛋白在制备在100℃以下环境下能够抑菌的药物中的应用，所述抗菌蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供了甲基营养型芽孢杆菌wswGH-10的抗菌蛋白在制备在中性和酸性环境中能够抑菌的药物中的应用，所述抗菌蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供了甲基营养型芽孢杆菌wswGH-10的抗菌蛋白在制备在紫外线照射环境下能够抑菌的药物中的应用，所述抗菌蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供了甲基营养型芽孢杆菌wswGH-10的抗菌蛋白在制备在光照环境下能够抑菌的药物中的应用，所述抗菌蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

优选的是，所述抑菌包括抑制尖孢镰刀菌和/或立枯丝核菌的活性。

本发明还提供了上述技术方案所述应用中的甲基营养型芽孢杆菌wswGH-10的培养方法，包括以下步骤：

将甲基营养型芽孢杆菌wswGH-10接种于LB培养基中，30℃培养48h，得到甲基营养型芽孢杆菌wswGH-10的培养液。

本发明还提供了上述技术方案所述应用中的甲基营养型芽孢杆菌wswGH-10的抗菌蛋白的分离纯化方法，包括以下步骤：

将甲基营养型芽孢杆菌wswGH-10的培养液离心，得到上清液；