[发明专利]一种基于HPLC特征图谱的枣仁安神胶囊全药味多成分含量测定方法

说明书

本发明涉及一种基于HPLC特征图谱的枣仁安神胶囊全药味多成分含量测定方法。所述方法包括建立HPLC特征图谱、制备供试品溶液、HPLC进样测定、记录样品中待测成分的峰面积、计算其含量。本发明采用了优化后的枣仁安神胶囊HPLC‑UV方法，实现了枣仁安神胶囊的全药味特征图谱检测，并同时测定了全药味中10个成分的含量，实现了枣仁安神胶囊的全药味多成分含量测定。

技术领域

本发明属于检验分析技术领域，具体涉及一种基于HPLC特征图谱的枣仁安神胶囊全药味多成分含量测定方法。

技术背景

枣仁安神成方制剂(简称枣仁安神制剂)是由炒酸枣仁、丹参、醋五味子制得的中药复方制品，具有养血安神的功效，临床用于治疗心血不足引起的失眠、健忘、心烦、头晕及神经衰弱症见上述证候者。枣仁安神制剂主要包括胶囊、颗粒和口服液3种剂型。胶囊剂为药材经75％乙醇、60％乙醇、水依次回流提取，浓缩后加淀粉制成颗粒装入胶囊所得；颗粒剂为药材经水煎煮，浓缩后加糊精制成颗粒；口服液为药材经水提取，浓缩后加辅料和水煮沸，过滤而得。

目前国外主流国家和地区的药典，包括《欧洲药典》、《美国药典》、《日本药典》、《英国药典》等，均未收载枣仁安神制剂。我国药典和部分中药成方制剂标准中收载有枣仁安神胶囊、颗粒及口服液的质量标准，如《中国药典》一部2020年版和《新药转正标准》第72册中收载了枣仁安神胶囊质量标准，《中国药典》一部2020年版和《卫生部药品标准中药成方制剂》第11册中收载有枣仁安神颗粒(冲剂)质量标准，《卫生部药品标准中药成方制剂》第18册中收载有枣仁安神液质量标准。

枣仁安神制剂在我国不同标准中的收载项目及规定有所不同，以《中国药典》2020年版收载各项指标最为全面，涵盖了性状、薄层色谱(TLC)鉴别、HPLC特征图谱和HPLC含量测定的检测内容。相同制剂的相同检测项在不同标准中的规定有所不同。如枣仁安神胶囊TLC鉴别项下，《中国药典》2020年版以酸枣仁提取物或酸枣仁皂苷A，B为对照，《新药转正标准》则以酸枣仁皂苷A、原儿茶醛及五味子甲素为对照。各标准中以《中国药典》2020年版最为完善，虽然通过综合采用TLC鉴别、HPLC特征图谱以及含量测定基本实现了对枣仁安神胶囊的全药味主成分控制，但是该质量标准仍有待完善，尤其特征图谱中共有峰和色谱峰的指认较少，有待进一步提高。

高效液相色谱(HPLC)可以快速地对中药材及其制剂中的化学成分进行定性、定量分析，在中药化学分析与质量控制中应用广泛，是《中国药典》中枣仁安神胶囊和颗粒质量控制的重要方法。目前HPLC主要用于枣仁安神制剂的特征图谱、指纹图谱分析及主要成分的含量测定，但是仅有枣仁安神胶囊和颗粒制剂的HPLC指纹图谱或特征图谱的研究报道；枣仁安神胶囊、颗粒和口服液制剂的HPLC含量测定均有研究报道，含量测定成分主要集中在酸枣仁中的斯皮诺素、酸枣仁皂苷A，丹参中的丹参酮ⅡA、丹酚酸B，五味子中的五味子醇甲、五味子醇乙，其他成分如酸枣仁中的酸枣仁皂苷B、酸枣仁皂苷A1、白桦酯酸、木兰花碱，丹参中的丹参素，五味子中的五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、戈米辛H、戈米辛F等也有报道。尽管目前对枣仁安神制剂中的1-7个成分的含量测定均有报道，个别研究涵盖全部3味药材的主要成分，但多数文献还是仅测定其中某个单一成分含量。

发明内容

针对《中国药典》2020年版及文献中对于枣仁安神胶囊的特征图谱检测，所指认的色谱峰较少，且《中国药典》2020年版没有达到全药味特征图谱分析的情况，以及《中国药典》2020年版枣仁安神胶囊的含量测定项中，仅测定了斯皮诺素、丹参酮II_A和五味子醇甲三种成分的含量，且斯皮诺素与另两者分别测定，测定成分较少，且分析时间较长的问题，本发明的目的是提供一种基于高效液相色谱(HPLC)的枣仁安神胶囊的特征图谱检测方法，以及基于所得特征图谱的枣仁安神胶囊全药味多成分含量测定方法。所述特征图谱中指认了涵盖全药味成分的14个色谱峰，实现了枣仁安神胶囊的全药味特征图谱检测，并同时测定了全药味中10个成分的含量，实现了枣仁安神胶囊的全药味多成分含量测定。