[发明专利]非同源双链寡聚核苷酸片段在基因敲除系统中的应用有效
申请号: | 202110564429.3 | 申请日: | 2021-05-24 |
公开(公告)号: | CN113403309B | 公开(公告)日: | 2022-08-16 |
发明(设计)人: | 谢红娴;兰凯;黄龙 | 申请(专利权)人: | 珠海舒桐医疗科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10 |
代理公司: | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人: | 汪青;周敏 |
地址: | 519013 广东省珠海市横琴新区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 同源 双链寡聚 核苷酸 片段 基因 系统 中的 应用 | ||
1.非同源双链寡聚核苷酸片段在提高CRISPR/Cas9系统对靶基因的切割效率中的应用,其特征在于:将CRISPR/Cas9系统和非同源双链寡聚核苷酸片段在体外共转染细胞,所述的非同源双链寡聚核苷酸片段由SEQ ID NO.6所示的序列以及与之反向完全互补配对的序列组成,所述的非同源双链寡聚核苷酸片段的5′端进行磷酸化修饰、5′端的三个核苷酸中相连两个核苷酸之间进行硫甙修饰、3′的三个核苷酸中相连两个核苷酸之间进行硫甙修饰。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述的CRISPR/Cas9系统和非同源双链寡聚核苷酸片段针对人乳头瘤病毒18型E7基因进行敲除,所述的CRISPR/Cas9系统的sgRNA的序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。
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