[发明专利]一种血清中泌乳素单体的检测方法在审
申请号: | 202110568728.4 | 申请日: | 2021-05-25 |
公开(公告)号: | CN113189353A | 公开(公告)日: | 2021-07-30 |
发明(设计)人: | 胡尧;张心菊;关明 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属华山医院 |
主分类号: | G01N33/74 | 分类号: | G01N33/74;G01N1/28;G01N1/34 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人: | 余永莉 |
地址: | 200040 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 血清 中泌乳素 单体 检测 方法 | ||
本发明提供一种血清中泌乳素单体的检测方法,所述检测方法包括以下步骤:S1:取适量血清加入等体积的25%聚乙二醇6000溶液中,进行预处理沉淀;S2:室温下涡流混合5~10min;S3:高速离心10~15min,取上清液;S4:采用免疫分析仪对步骤S3中所得上清液进行检测,所得检测结果乘以稀释因子2,即可获得所述血清中泌乳素单体的浓度。根据本发明,首次实现了对血清中泌乳素单体的检测,不仅为高泌乳素血症的诊断提供了依据,而且为患者节省了诊疗时间以及降低了诊疗费用,因此本发明所提供的检测方法在生物分子临床检测中具有推广价值。
技术领域
本发明涉及生物分子检测技术领域,更具体地涉及一种血清中泌乳素单体的检测方法。
背景技术
泌乳素又称催乳素,是脑垂体所分泌的激素中的一种。妇女在怀孕后期及哺乳期,泌乳素分泌旺盛,以促进乳腺发育与泌乳。非孕妇女血清中泌乳素水平最高值一般不会超过20纳克/毫升。
泌乳素由集中于垂体后方两侧的专一细胞所分泌,与生长激素源于同一细胞。泌乳素升高,医学上称作高泌乳素血症,这是一种下丘脑-垂体-性腺轴功能失调性疾病,其主要症状为月经量明显减少,月经稀发甚至闭经,不孕,溢乳,更年期症状等。
泌乳素过高还会使卵巢对促性腺激素失去应有的反应能力,雌激素、孕激素合成因而明显减少,使在受孕过程中起重要作用的雌激素呈现低水平状态,直接影响孕育功能。当性激素的大量减少至一定程度,还会使患者出现酷似女性更年期的诸多症状。
泌乳素瘤是最常见的垂体腺瘤,是病理性高泌乳素血症的主要原因,仅次于原发性甲状腺功能减退症。当外周血循环中有超过60%泌乳素由巨泌乳素构成时定义为巨泌乳素血症,在15-46%的高泌乳素血症患者中存在巨泌乳素。早期筛查巨泌乳素可以减少临床不必要药物治疗和过度影像学检查,但常规泌乳素检测无法鉴定巨泌乳素血症。所以对泌乳素增高患者及时筛查巨泌乳素是诊疗的必要环节,也是高泌乳素血症治疗的难点。
发明内容
本发明的目的是提供一种血清中泌乳素单体的检测方法,从而解决现有技术中缺乏血清中泌乳素单体的检测方法的问题。
为了解决上述技术问题,本发明采用以下技术方案:
提供一种血清中泌乳素单体的检测方法,所述检测方法包括以下步骤:S1:取适量血清加入等体积的25%聚乙二醇6000溶液中,进行预处理沉淀;S2:室温下涡流混合5~10min;S3:高速离心10~15min,取上清液;S4:采用免疫分析仪检测步骤S3中所得上清液中的泌乳素,所得检测结果乘以稀释因子2,即可获得所述血清中泌乳素单体的浓度。
优选地,步骤S2包括:室温下涡流混合5min。
优选地,步骤S3包括:13400rpm离心10min,取上清液。
所述25%聚乙二醇6000溶液通过将25g聚乙二醇6000溶解于1000毫升去离子水制得。
泌乳素在外周血清中有三种异构形式,其中具有生物活性和免疫活性的泌乳素单体含量约有60-90%;有15-30%为无生物学活性的二聚体,另有小于10%为较低生物学活性的四聚体以及免疫球蛋白和泌乳素单体的聚合物,称为巨泌乳素。由于人们一直以来对于巨泌乳素血症认识不够,目前检验科没有一种能够完全区分真性高泌乳素血症(泌乳素单体水平增加)和巨泌乳素血症(泌乳素单体浓度正常)的免疫分析方法。根据目前临床上的常规操作,医生通常采用影像学检查,如核磁共振等以及经验性药物治疗对高泌乳素血症进行诊断。然而,本发明的发明人经过研究发现,泌乳素单体是具有生物活性的,通过聚乙二醇能够沉淀大分子蛋白质,沉淀血清中的二聚体、四聚体泌乳素和巨泌乳素,离心后上清液中只有泌乳素单体,从而首次实现了血清中泌乳素单体的检测,摒弃了回收率的计算。
根据本发明提供的方法,不仅限于电化学发光免疫分析仪,其他可以检测泌乳素的免疫分析仪都可采用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于复旦大学附属华山医院,未经复旦大学附属华山医院许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110568728.4/2.html,转载请声明来源钻瓜专利网。