[发明专利]一种基于聚beta-氨基酯/PEGDA可注射水凝胶的制备方法

权利要求书

1.一种基于聚beta-氨基酯/PEGDA可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1，制备丙烯酰基封端且含炔基的聚beta-氨基酯；

步骤2，制备含叠氮的活性物质；包括制备含叠氮的神经生长因子活性肽和制备含叠氮的甲基强的松龙衍生物；

步骤3，制备偶联有神经生长因子活性肽，甲基强的松龙衍生物的聚beta-氨基酯；

步骤4，制备丙烯酰基封端且偶联有神经生长因子活性肽，甲基强的松龙衍生物的水凝胶。

2.根据权利要求1所述一种基于聚beta-氨基酯/PEGDA可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤1中制备丙烯酰基封端且含炔基的聚beta-氨基酯，具体方法为：

氮气保护条件下，聚乙二醇丙烯酸酯0.66g,3.3mmol，炔丙胺0.165g,3mmol搅拌溶解在10mL氯仿中，反应液加热到50℃搅拌反应12小时；反应液升温到80℃反应12h，反应溶液经透、冻干得到丙烯酰基封端且含炔基的聚beta-氨基酯。

3.根据权利要求1或2所述一种基于聚beta-氨基酯/PEGDA可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤2中制备含叠氮的活性物质；具体包括如下步骤：

步骤2.1，制备含叠氮的神经生长因子活性肽；

通过计算机模拟，选取神经生长因子中含有Loop4片段的85-100序列与TrkA结合的片段(TFVKALTMDGKQAAWR)；通过固相合成法，以Fmoc化学策略制备，粗产品经反相高效液相色谱分离纯化得到带有叠氮的神经生长因子活性肽[K(N₃)TFVKALTMDGKQAAWR]；

步骤2.2，制备含叠氮的甲基强的松龙衍生物；

通过固相合成法，以Fmoc化学策略制备，粗产品经反相高效液相色谱分离纯化得到带有叠氮的甲基强的松龙衍生物。

4.根据权利要求3所述一种基于聚beta-氨基酯/PEGDA可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤3中制备偶联有神经生长因子活性肽，甲基强的松龙衍生物的聚beta-氨基酯，具体方法为：

氮气保护条件下，丙烯酰基封端且含炔基的聚beta-氨基酯66mg,含有叠氮的甲基强的松龙衍生物0.01mmol溶解在2mL四氢呋喃的溶液中，五水硫酸铜0.005mmol溶解在0.2mL水溶液，加入上述溶液中；将抗坏血酸钠0.01mmol溶解在0.2mL水溶液中，通过注射器加入到上述溶液中还原硫酸铜为一价铜催化点击化学反应；继续搅拌反应四小时，反应溶液经透析、冻干得到丙烯酰基封端且含甲基强的松龙衍生物的聚beta-氨基酯；

通过相同的制备步骤得到丙烯酰基封端且偶联有神经生长因子活性肽的聚beta-氨基酯。

5.根据权利要求4所述一种基于聚beta-氨基酯/PEGDA可注射水凝胶的制备方法，其特征在于，步骤4中制备丙烯酰基封端且偶联有神经生长因子活性肽、甲基强的松龙衍生物的水凝胶，具体方法为：

利用偶联有神经生长因子活性肽，甲基强的松龙衍生物的聚beta氨基酯末端的丙烯酰基与PEGDA溶解在水溶液中，加入过硫酸胺，加热引发聚合反应；新制备的水凝胶经过PBS浸泡，除去未反应的小分子和引发剂；通过改变聚beta氨基酯末端的丙烯酰基与PEGDA的浓度制备杨氏模量为0.18KPa，0.36KPa，0.72KPa和1.4KPa力学性能的水凝胶。