[发明专利]一种通过流式细胞仪同时检测线粒体膜电位和质量的荧光探针及其合成方法在审
| 申请号： | 202110570964.X | 申请日： | 2021-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN113292474A | 公开（公告）日： | 2021-08-24 |
| 发明（设计）人： | 李国平;黄兴琳;楼忠泽;郑莉美;聂雅洁 | 申请（专利权）人： | 泛肽生物科技（浙江）有限公司 |
| 主分类号： | C07D209/08 | 分类号： | C07D209/08;C09K11/06;G01N21/64 |
| 代理公司： | 浙江中桓凯通专利代理有限公司 33376 | 代理人： | 李美宝 |
| 地址： | 315000 浙江省宁波市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 通过 细胞 同时 检测 线粒体 膜电位 质量 荧光 探针 及其 合成 方法 | ||
1.一种同时检测细胞内线粒体膜电位和质量的探针，其特征在于，结构式为：
。
2.一种同时检测细胞内线粒体膜电位和质量的探针的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：
S10：将化合物A、4-氯甲基苯甲酸甲酯和氢氧化钠溶于N,N-二甲基甲酰胺中，反应得到A1；
S20：将化合物M1溶于氯甲烷中，闷罐反应，得到M2；
S30：将3-二甲氨基丙烯醛溶于乙腈中，冰浴下，滴加三氯氧磷，搅拌，混合液冰浴下滴加至M2的乙腈溶液中，反应得到M3；
S40：将M3、A1溶于甲苯、 N-甲基吡咯烷酮溶液中，反应得到M4；
S50：将M4溶于甲醇中，分批加入NaBH4，淬灭，过滤，析出固体，过滤，烘干滤饼，得到M5；
S60：将M5、三苯基膦、四氯化碳溶于N,N-二甲基甲酰胺，搅拌，粗品经C18液相纯化得到目标产品TM；
其中A、A1、M1、M2、M3、M4、M5、TM的结构式分别为：
、、、、、、、。
3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，步骤S10中的反应条件为在80°C下反应6小时，过滤，萃取，用无水硫酸钠干燥有机相，浓缩，粗品经过柱层析得到A1。
4.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，步骤S30中的反应条件为升至室温反应4小时，加水淬灭反应，加入氢氧化钠水溶液，析出固体，过滤。
5.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，步骤S10中所述化合物A、4-氯甲基苯甲酸甲酯和氢氧化钠的质量比为1：（1~2）：（0.5~1）。
6.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，步骤S30中所述3-二甲氨基丙烯醛和所述三氯氧磷的质量比为1：（1~2）。
7.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，步骤S40中所述M3和所述A1的质量比为1：（0.5~1.5），所述甲苯溶液和所述N-甲基吡咯烷酮溶液的体积比为2:1。
8.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，步骤S50中所述M4和所述NaBH4的质量比为（2~3）：1。
9.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，步骤S60中所述M5、三苯基膦和四氯化碳的质量比为3：（1~2）：（1~2）。
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