[发明专利]一种重组新城疫病毒基质蛋白及其应用有效
| 申请号： | 202110571930.2 | 申请日： | 2021-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN113214366B | 公开（公告）日： | 2023-03-03 |
| 发明（设计）人： | 仇旭升;丁铲;孟春春;谭磊;孙英杰;于圣青;刘炜玮;宋翠萍;廖瑛 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心) |
| 主分类号： | C07K14/125 | 分类号： | C07K14/125;C12N15/45;C12N7/01;C12N15/85;C12N5/10;A61K39/17;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋 |
| 地址： | 200241 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 新城 疫病 基质 蛋白 及其 应用 | ||
1.一种重组新城疫病毒基质蛋白，其特征在于，所述重组新城疫病毒基质蛋白为发生了R247K和S263R突变的基质蛋白；
突变前的基质蛋白为M蛋白，其GenBank登录号为AEY84921.1；
所述新城疫病毒为新城疫病毒疫苗株La Sota株。
2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的重组新城疫病毒基质蛋白；
所述核酸分子包括SEQ ID No.6所示的核苷酸序列。
3.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体含有权利要求2所述的核酸分子。
4.一种重组细胞，其特征在于，所述重组细胞含有权利要求3所述的重组载体。
5.根据权利要求4所述的重组细胞，其特征在于，所述重组细胞中还含有辅助质粒。
6.一种重组新城疫病毒，其特征在于，所述重组新城疫病毒含有权利要求1所述的重组新城疫病毒基质蛋白和/或权利要求2所述的核酸分子。
7.一种权利要求6所述的重组新城疫病毒的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
将重组载体和辅助质粒共转染至包装细胞中，得到重组细胞；培养所得重组细胞，收集培养上清，接种至鸡胚中，传代培养，得到所述的重组新城疫病毒；
所述重组载体含有编码所述重组新城疫病毒的全长序列；
所述包装细胞包括BSR T7/5细胞；
所述辅助质粒包括PCI-NP、PCI-P或PCI-L中的任意一种或至少两种的组合；
所述培养的时间为54~66 h；
所述传代培养的次数为4~6次。
8.根据权利要求7所述的重组新城疫病毒的制备方法，其特征在于，所述培养的时间为60 h；
所述传代培养的次数为5次。
9.根据权利要求7所述的重组新城疫病毒的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
（1）将编码所述重组新城疫病毒的全长序列的重组载体和辅助质粒PCI-NP、PCI-P和PCI-L共转染至BSR T7/5细胞中，得到重组细胞；
（2）培养所得重组细胞54~66 h，收集培养上清，接种至鸡胚中，传代培养4~6次，得到所述的重组新城疫病毒。
10.权利要求1所述的重组新城疫病毒基质蛋白、权利要求2所述的核酸分子、权利要求3所述的重组载体、权利要求4或5所述的重组细胞或权利要求6所述的重组新城疫病毒中的任意一种或至少两种的组合在制备新城疫病毒疫苗方面的应用。
11.一种新城疫病毒疫苗，其特征在于，所述新城疫病毒疫苗含有权利要求1所述的重组新城疫病毒基质蛋白和/或权利要求6所述的重组新城疫病毒。
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