[发明专利]一种海藻糖转化率提高的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体及其应用

权利要求书

1.一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体，其特征在于，所述突变体是通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的麦芽寡糖基海藻糖合成酶的第47氨基酸进行突变得到的。

2.如权利要求1所述的一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体，其特征在于，所述突变体是通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的麦芽寡糖基海藻糖合成酶的第47位氨基酸由丝氨酸突变为脯氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、缬氨酸、亮氨酸、天冬酰胺或丙氨酸得到的。

3.编码权利要求1或2所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的重组质粒。

5.如权利要求4所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒以pUC质粒载体、pET质粒载体或pGEX质粒载体为表达载体。

6.携带权利要求3所述基因，或权利要求4或5所述重组质粒的重组细胞。

7.如权利要求6所述的重组细胞，其特征在于，所述重组细胞以细菌或真菌为宿主细胞。

8.权利要求1或2所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体，或权利要求3所述基因，或权利要求4或5所述重组质粒，或权利要求6或7所述的细胞在生产海藻糖中的应用。

9.一种生产海藻糖的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)向大米淀粉溶液中加入α-淀粉酶，得到经液化的大米淀粉溶液；

(2)分别向得到经液化的大米淀粉溶液添加普鲁兰酶、环糊精葡萄糖基转移酶、4-α糖基转移酶、麦芽寡糖基海藻糖水解酶进行酶催化反应，得到反应液；

(3)将权利要求1或2所述的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体添加至反应液中，制备得到海藻糖。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述经液化的大米淀粉溶液的DE值为16～20。